背景:有机阴离子转运多肽2B1（OATP2B1）是有机阴离子转运多肽家族中的一员,在体内的许多器官和组织中都有表达。OATP2B1作为一种摄取转运蛋白,参与许多相关底物药物和内源性物质的转运。吸烟引发的呼吸系统疾病一直都是一个公共卫生问题,特别是慢性阻塞性肺疾病（COPD）,香烟烟雾是诱导COPD的主要因素,香烟烟雾能诱导炎症的产生和肺损伤,造成气道受阻以及肺部的结构和功能异常。大量的研究数据表明,在一些疾病发生发展的过程中,转运蛋白的表达活性以及运输功能会发生改变,从而可能影响其底物药物的吸收分布。因此,本课题着力于探究香烟烟雾联合脂多糖（LPS）诱导的肺部炎症状态下对OATP2B1的表达活性以及转运功能的调节作用,以及为此类肺部炎症疾病的药物治疗提供新的指导思路。目的:（1）探究在香烟烟雾联合脂多糖诱导的肺部炎症中对大鼠肺组织和肺上皮细胞A549中转运蛋白OATP2B1表达的调节作用;（2）探究肺部炎症下对转运蛋白OATP2B1摄取转运活性的影响方法:（1）在体内实验中,将购进的20只SD大鼠随机分成2组,分别为正常对照组和炎症模型组（每组10只）,实验要求每只SD大鼠必须为成年健康雄性大鼠,并且体重应在230～280g的范围内,造模开始前应在适宜的环境中适应一周。体内实验的造模周期为4周。在第一天和第十四天中将模型组的SD大鼠气管滴注LPS,其余每天将模型组大鼠固定时间在较为密闭的铁箱环境中烟熏一小时。对照组大鼠在第一天与第十四天气管滴注等体积的生理盐水,并且其余每天也放置在无烟环境的铁箱中作为对照分析。第29天,处死所有SD大鼠,取大鼠肺组织用于检测OATP2B1以及相关炎症因子如IL-6、TNF-α的表达水平,另外取部分肺组织在4%多聚甲醛中固定过夜,乙醇脱水制成石蜡切片（4μm）。脱蜡切片进行HE染色、免疫组化等组织学和病理学观察与分析,以判断肺部的炎症状况。（2）在体外实验中,根据课题组前期的设计研究,利用抽滤机以及过滤装置制备一定浓度的香烟烟雾提取物（CSE）。首先,使用MTT比色法检测浓度梯度的CSE以及固定浓度的LPS联合作用下对肺上皮细胞A549的细胞活力的影响并且综合查阅相关文献来确定合适的给药浓度范围。其次,使用免疫印迹法（Western Blot）以及实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测不同浓度CSE和LPS联合作用下对A549细胞中OATP2B1以及相关炎症因子如IL-6、TNF-α的表达水平。此外,还使用Western Blot以及q RT-PCR检测了单独CSE、单独LPS以及CSE联合LPS三种不同模型条件下对A549细胞中OATP2B1以及相关炎症因子如IL-6、TNF-α的表达水平。最后,使用流式细胞仪检测A549细胞摄取OATP2B1标记物二溴荧光素（DBF）时与底物浓度和孵育时间的关系,并筛选出适宜的底物浓度以及孵育时间后探究不同炎症模型条件下对A549细胞摄取DBF的影响。结果:（1）体内实验结果:相比较于正常对照组,造模完成后,HE染色和免疫组化结果显示出模型组大鼠肺组织明显的炎症损伤,证明了此模型的成功建立。此外,Western Blot以及q RT-PCR结果显示相关炎症因子的表达的上调也证明了肺部的炎症状态。OATP2B1在烟熏刺激以及气管滴注LPS诱导的大鼠肺部炎症模型中的m RNA以及蛋白表达上调。（2）体外实验结果:MTT结果显示4%浓度CSE和LPS（0.1μg/ml）组细胞活力明显低于正常对照组,因此采用0、0.5%、1%、2%四个浓度的CSE进行后续实验研究。Western Blot以及q RT-PCR结果显示CSE联合LPS处理A549细胞后,OATP2B1以及相关炎症因子如IL-6、TNF-α的表达上调,并且随着CSE浓度的升高,表达水平呈现浓度依赖性升高。此外,与正常对照组相比,单独CSE、单独LPS以及CSE联合LPS三种不同模型条件下,CSE联合LPS模型组的相关蛋白表达水平差异相比较于另外两种更明显,因此,更适合使用CSE与LPS联合作用来诱导炎症模型。流式细胞仪检测的结果显示A549细胞摄取DBF具有浓度依赖性和时间依赖性,并且在炎症状态下检测到A549细胞摄取DBF的荧光强度更高。结论:通过对体内体外的的实验结果研究可以发现:香烟烟雾联合脂多糖可以诱导大鼠肺组织炎症模型以及肺上皮细胞A549炎症模型,并且炎症状态下上调了转运蛋白OATP2B1的表达活性和转运功能,这一调节作用可能为后续研究肺部炎症状态下转运蛋白的调控机制提供了模型和基础。