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背景:我国是世界上结直肠癌的高发地区之一,近年来结直肠癌发病率上升趋势显著,晚期结直肠癌治疗方式也非常有限,因此寻找高效的治疗策略十分必要。血管生成素样蛋白4(Angiopoietin-like4,ANGPTL4)是近年来发现的一类新的分泌性糖蛋白,研究发现ANGPTL4的羧基端结构在调节肿瘤生长、血管生成和细胞跨内膜转移中发挥重要作用。同时,调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)及M2型巨噬细胞在肿瘤中的促进作用也逐渐被证实。因此,针对ANGPTL4与Treg细胞、M2型巨噬细胞的研究或许可以为未来的结直肠癌靶向治疗、免疫治疗提供新的思路。目的:1、探究结直肠癌细胞中是否存在ANGPTL4的高表达。2、研究不同分期结直肠癌和癌旁组织中ANGPTL4的表达水平;3、研究结直肠癌ANGPTL4的表达是否与肿瘤中Treg细胞及M2型巨噬细胞的浸润水平存在相关。方法:首先,在体外实验中选取了人和小鼠结直肠癌细胞HCT116、MC38,利用免疫荧光方法检测人鼠结直肠癌细胞中ANGPTL4的表达情况。其次,收集70例结直肠癌患者外周血血清及10例健康人群外周血作为对照,用ELISA法检测两组血清中ANGPTL4的浓度。利用免疫组织化学法及蛋白免疫印迹法检测不同分期结直肠癌组织ANGPTL4、Foxp3、CD163的表达,并利用统计方法分析其相关性。最后将ANGPTL4的重组蛋白加入小鼠脾脏细胞培养体系中,分别诱导刺激72小时、48小时后,利用流式细胞术检测Treg细胞及M2型巨噬细胞的比例。结果:1、人和小鼠结直肠癌细胞HCT116、MC38中ANGPTL4均有不同程度的表达。2、与健康对照组相比,结直肠癌血清中ANGPTL4的浓度明显升高,且Dukes CD期患者血清ANGPTL4的浓度显著高于AB期患者。3、与癌旁组织相比,结直肠癌组织中ANGPTL4的表达及Treg细胞、M2型巨噬细胞的浸润均明显上调,且Dukes CD期癌组织ANGPTL4的表达及Treg细胞、M2型巨噬细胞的浸润显著高于Dukes AB期。4、相关性分析显示无论是组织还是血清中ANGPTL4的水平均与组织Treg细胞、M2型巨噬细胞的浸润呈明显正相关。5、ANGPTL4重组蛋白的加入增加了 Treg细胞及M2型巨噬细胞的比例,表明ANGPTL4重组蛋白或可促进Treg细胞、M2型巨噬细胞的诱导分化。结论:ANGPTL4有望成为结直肠癌诊断的肿瘤标记物,而Treg细胞、M2型巨噬细胞的诱导变化可能是ANGPTL4促进肿瘤进展的机制之一。