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目的:研究体外人脐带间质干细胞(huc MSCs)及其外泌体对单核巨噬细胞表型和部分功能的影响。方法:1.采用组织块贴壁法,从人脐带组织中培养间质干细胞,后续实验使用3~6代huc MSCs。2.huc MSCs与单核巨噬细胞共培养条件的摸索及使用Luminex方法初筛炎症因子的分泌变化并对部分因子做进一步确定。3.采用高速超速离心法提取huc MSCs的外泌体,用Western blot及电镜做进一步鉴定,使用BCA蛋白测定法检测外泌体的浓度,并调整浓度为0.1 mg/m L备用。4.采用普通PCR及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测huc MSCs及其来源的外泌体作用单核巨噬细胞后炎性因子IL-8、IL-12、IL-10 m RNA的表达;采用蛋白印迹法及ELISA法从蛋白水平检测huc MSCs及其来源的外泌体作用单核巨噬细胞后,单核巨噬细胞及其培养上清液中IL-8、IL-12、IL-10的表达;应用MTT法及Annexin V-FITC、PI双染色法及Transwell法等检测huc MSCs及其来源的外泌体对单核巨噬细胞增殖、凋亡和迁移等功能的影响。结果:1.成功分离培养并鉴定hucMSCs及其来源的外泌体。2.hucMSCs与单核巨噬细胞共培养比例为1:2时,细胞生长状态良好,且在此比例下培养24 h时,相关炎性因子m RNA的分泌水平变化相对较明显。3.huc MSCs及其来源的外泌体在某种程度上可抑制M1型巨噬细胞因子IL-8、IL-12等的表达而上调M2型巨噬细胞因子IL-10等的表达。4.huc MSCs及来源外泌体在一定程度上可能促进单核巨噬细胞的增殖、抑制其凋亡并显著增加其迁移能力。结论:1.在体外hucMSCs及其外泌体可能促使单核巨噬细胞向M2型极化。2.huc MSCs及其外泌体可抑制单核巨噬细胞凋亡并增强其增殖和迁移能力。3.通过分泌外泌体可能是huc MSCs对单核巨噬细胞表型极化及部分功能影响的途径之一。