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目的:本实验以SCG-7901、SGC-7901/VCR、si-XIAP/SGC-7901、vector/SGC-7901为受试对象,研究DADS能否增强SGC-7901细胞凋亡及对5-Fu的敏感性,并进一步探讨DADS增强SGC-7901细胞凋亡及对5-FU的敏感性与XIAP表达的可能关系。方法:构建si-XIAP/SGC-7901细胞。MTT检测不同5-FU浓度处理下,检测各组SGC-7901细胞增殖抑制率的变化。流式细胞术检测各组SGC-7901细胞凋亡率的变化。Western blot与免疫荧光检测各细胞组中,XIAP、caspase-3、Bcl-2与P-gp表达的变化。结果:1.稳定沉默XIAP的SGC‐7901细胞的构建通过英潍捷基公司构建的pcDNA6.2-GW/EmGFP-miXIAP载体,分别将沉默XIAP载体及空载体转染SGC-7901细胞后,运用荧光显微镜观察转染后细胞,视野内可见大量绿色荧光细胞,加入杀稻瘟菌素筛选14天,形成荧光细胞团后接种至六孔板继续培养,成功构建si-XIAP/SGC-7901细胞。2.DADS及沉默XIAP对SGC-7901细胞系增殖能力的影响MTT结果证实,在不同5-FU浓度处理下,SGC-7901的增殖抑制率分别是2.092%、5.082%、13.602%、20.179%,DADS处理后的SGC-7901组增殖抑制率明显增加,分别是4.291%、11.874%、22.745%、47.353%、59.942%(P<0.05)。SGC-7901/VCR的增殖抑制率分别是0.157%、0.470%、0.940%、2.031%、4.073%(P<0.05)。DADS处理组后SGC-7901/VCR的增殖抑制率明显增加,分别是1.229%、3.471%、7.809%、19.017%、27.838%(P<0.05)。对比SGC-7901组,SGC-7901/si-XIAP的增殖抑制率增加,分别是:2.882%、8.067%、18.022%、35.147%、54.561%(P<0.05),vector/SGC-7901的增殖抑制率无明显变化,分别是:2.131%、5.182%、13.871%、20.581%、45.43%(P>0.05)。证实DADS及沉默XIAP后可以抑制SGC-7901细胞系的增殖能力,一定程度的增加对5-Fu药物的敏感性。3.DADS及沉默XIAP对SGC-7901细胞凋亡的影响。流式细胞仪检测结果证实,SGC-7901组及SGC-7901/VCR组细胞凋亡率分别是2.1%和0.24%。DADS处理后,SGC-7901组及SGC-7901/VCR组细胞凋亡率分别是27.8%和18.7%,较未处理组明显增加(P<0.05),si-XIAP/SGC-7901组凋亡率为22.47%,较SGC-7901组明显增加(P<0.05)。证实DADS及沉默XIAP后可以增加SGC-7901细胞系的凋亡率。4.DADS及沉默XIAP对SGC-7901细胞凋亡相关蛋白的影响Western blot检测结果显示,DADS处理后,SGC-7901组及SGC-7901/VCR组较未处理组XIAP、Bcl-2与P-gp表达下调(P<0.05),Caspase3上调(P<0.05)。si-XIAP/SGC-7901组较SGC-7901组XIAP、BCL-2、P-gp表达下调(P<0.05),Caspase3上调(P<0.05)。免疫荧光显示,DADS处理后,SGC-7901组及SGC-7901/VCR组较未处理组,XIAP、Bcl-2与P-gp荧光变弱,Caspase3荧光增强;si-XIAP/SGC-7901组较SGC-7901组XIAP、BCL-2与Pgp荧光减弱,Caspase3荧光增强;与Western blot结果一致。表明DADS可下调XIAP表达,DADS及沉默XIAP可下调抑制凋亡蛋白及耐药相关蛋白的表达,上调促凋亡蛋白表达。结论:1.DADS可下调XIAP、BCL-2与P-gp和上调Caspase3促进细胞凋亡与增强SGC-7901细胞对5-Fu的敏感性。2.沉默XIAP可下调BCL-2与P-gp和上调Caspase3促进细胞凋亡与增强SGC-7901细胞对5-Fu的敏感性。