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化学杀菌剂暴露出的诸多难以克服的缺点使新型生防菌剂研发成为一种趋势。在众多的生防细菌中,枯草芽孢杆菌凭借易培养,适应环境能力强,对人畜无毒等优点为众多科研人员所青睐。目前国内外已有商品化的枯草芽孢杆菌制剂,但用的枯草芽孢杆菌菌株不尽相同,因此防治对象也各不相同。本研究以本实验室从玉米小斑病叶片上分离得到的一株生防细菌菌株A（经鉴定为枯草芽孢杆菌,菌种保藏编号为CGMCCNo.1982,对玉米小斑病具较高的拮抗活性）为实验材料,对菌株A的拮抗谱及拮抗性能稳定性做了进一步研究;同时,对菌株A分泌的抗真菌蛋白进行了分离、纯化和鉴定;研究了抗菌蛋白的抗真菌机理。具体如下:1测定了菌株A的抑菌谱及其拮抗性能稳定性。以20种致病真菌和8种食用菌为材料,采用对峙培养法测定了菌株A的抑菌谱,结果表明:菌株A表现出广谱的抗菌活性。在20种致病真菌中,菌株A对柿角斑尾孢霉、苹果黑星病菌和番茄果腐瘤座菌等11种致病真菌的拮抗能力最强;在8种食用菌中,菌株A对蛹虫草,黄伞和黑木耳的拮抗能力最强。以玉米小斑病菌为指示菌,检测了菌株A拮抗活性对温度、pH及传代的稳定性。将摇瓶培养后的菌液分别于-20℃,-4℃,20℃,37℃,50℃下静置7d,菌株A拮抗能力没有明显变化;在pH 1～11条件下培养的菌株A拮抗能力无明显影响;连续继代培养10代,菌株A拮抗能力为出发菌株的95.8%。菌株A的拮抗活性表现出对温度、pH及传代的稳定性。2去除菌体后的菌株A发酵液经30%～60%饱和度的硫酸铵沉淀得到粗蛋白,采用DE-52阴离子交换柱和NaCl梯度洗脱方法对粗蛋白进行分离、纯化,得到活性组分Ⅴ,命名为FV。SDS-PAGE检测为单带,然后对其进行MALDI-TOF-MS检测得出最匹配结果为RNA-binding protein Hfq[Bacillus pumilus SAFR-032]。该蛋白质的相对分子质量为8478.5,等电点为8.09。3以玉米小斑病菌为材料,研究了抗菌蛋白FV对致病真菌的作用机理。（1）FV对玉米小斑病菌孢子萌发和附着胞形成的影响。结果显示:抑制玉米小斑?菌孢子萌发半数有效浓度(EC50)为138.32μg/mL。抑制附着胞形成的半数有效浓度(EC50)为22.23μg/mL。经过浓度为17.29μg/mL的抗菌蛋白FV处理的玉米小斑病菌附着胞畸形,膨大成圆泡状。（2）FV对玉米小斑病菌菌丝形态的影响。光学显微镜下观察发现,经FV处理后的玉米小斑病菌菌丝出现明显畸形,在菌丝顶端、中部出现膨大泡囊;随着处理时间的延长,菌丝畸形现象更加明显。扫描电子显微镜观察发现,FV处理后的菌丝表面变粗糙;膨大泡囊表面凹凸不平,并残留有碎片。（3）FV对玉米小斑病菌菌丝细胞内部结构的影响。透射电子显微镜下观察发现,FV处理后,菌丝细胞致密、有序、细胞器清晰可见的原生质结构受到影响。原生质变得“稀薄”,同时出现“空泡”;细胞器发生不同程度的分解;细胞壁不规则加厚,并可见细胞壁分解现象;有的菌丝里出现“子菌丝”。（4）FV对玉米小斑病菌菌丝细胞膜的影响。与空白对照相比,处理后培养液的电导率没有出现显著差异。据此判断:FV的作用位点可能没有在细胞膜上。