【摘 要】
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本研究为探索初情期母牦牛发情启动的特点，以青海省海晏县初情期母牦牛为研究对象。采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, Elisa)对初情期母牦牛在发情期
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本研究为探索初情期母牦牛发情启动的特点，以青海省海晏县初情期母牦牛为研究对象。采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, Elisa)对初情期母牦牛在发情期内24小时内各时段血液中促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone, GnRH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone, LH)以及卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone, FSH)浓度进行检测；运用苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosinstaining, HE)法对初情期母牦牛卵巢、子宫、乳腺组织进行染色，对比发情母牦牛与未发情母牦牛各个组织的发育差异；运用分子生物学技术，测定影响哺乳动物初情期启动的两种基因：Kiss-1基因和 GPR54基因的CDS序列，并进行了同源性分析。对初情期母牦牛下丘脑Kiss-1 mRNA、GPR54 mRNA进行实时荧光定量分析以及利用免疫组织化学测定初情期母牦牛下丘脑kisspeptins的表达情况。结果如下： 1.发情期内，发情母牦牛血液 GnRH、LH、FSH的浓度均高于未发情母牦牛（P＜0.05），且GnRH与LH的分泌趋势呈正相关。 2.发情母牦牛卵巢多见初级卵泡、次级卵泡，而未发情母牦牛卵巢多见初级卵泡和闭锁卵泡；对子宫进行HE染色后发现，发情母牦牛子宫内膜中浅层腺体、深层腺体数量均多于未发情母牦牛（P＞0.05），但是扩张腺管数量少于未发情母牦牛（P＞0.05）;对乳房进行HE染色后发现，发情母牦牛与未发情母牦牛乳腺上皮细胞均为单层立方上皮细胞。其中发情母牦牛叶间导管、腺泡均比未发情母牦牛发达。 3.确定了初情期母牦牛Kiss-1基因、GPR54基因的CDS序列，并对其进行核苷酸同源性比较，发现牦牛与牛、羊、人、大鼠、小鼠序列，存在显著差异。 4.发情母牦牛下丘脑Kiss-1 mRNA、GPR54 mRNA表达高于未发情母牦牛，并且Kisspeptins核团在下丘脑中的表达较未发情母牦牛较多。 研究结果表明，Kiss-1/GPR54系统是初情期母牦牛发情启动的关键能够有效的刺激GnRH神经元，调节GnRH的合成与分泌，进而调节LH与FSH的合成与分泌，使卵巢、子宫、乳房呈现明显发育，进而调控初情期母牦牛初情期启动顺利进行。
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