【摘 要】
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目的:检测痔组织中micro RNA的表达差异及探索痔血宁合剂对湿热下注型混合痔micro RNA的调控机理方法:本课题共分为两部分,第一部分收取3例湿热下注型混合痔的痔核组织及3例正常肛门周围组织进行总RNA提取及病理学鉴定,然后用RNA-seq测序对比痔核组织及肛周正常组织mi RNA及MRNA的差异表达谱,利用差异倍数检验(FOLD change)、t-test进行差异mi RNAs筛选,对
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目的:检测痔组织中micro RNA的表达差异及探索痔血宁合剂对湿热下注型混合痔micro RNA的调控机理方法:本课题共分为两部分,第一部分收取3例湿热下注型混合痔的痔核组织及3例正常肛门周围组织进行总RNA提取及病理学鉴定,然后用RNA-seq测序对比痔核组织及肛周正常组织mi RNA及MRNA的差异表达谱,利用差异倍数检验(FOLD change)、t-test进行差异mi RNAs筛选,对相关的靶向基因的预测,以及与靶向基因相关的通路分析;收取24例湿热下注型混合痔患者的痔核组织及24例肛周正常组织进行总RNA提取、c DNA逆转录、q PCR验证基因芯片结果;第二部分收取16例湿热下注型混合痔患者,分为单纯手术组及中药干预组,分别收取痔核组织,进行总RNA提取及c DNA逆转录,q PCR等实验,并对结果进行统计分析用药与否对痔核组织micro RNA的调控机制。结果:(1)痔核组织与正常组织间存在显著的micro RNA表达差异(2)micro RNA作为一种微小非编码的RNA序列,在混合痔的痔核组织内部的表达差异具有显著性,同时也存在有多个靶向基因。(3)Gene Ontology分析显示痔核存在多种生理生化活性的异常(4)在痔的发生过程中,Endocytosis和Synaptic vesicle cycle两条通路是micro RNA最有可能的调控靶点(5)对RNA-Seq转录组高通量测序得到的测序结果进行验证,验证结果与测序结果相一致,验证实验方法采用实时荧光定量PCR(6)痔血宁合剂对于经筛选后的9条micro RNA中的8条有显著的转录调控作用。结论:痔核组织与肛周正常组织间存在差异表达的micro RNA,且差异表达的micro RNA存在多个靶基因,GO分析及组织病理学鉴定都显示痔核存在生理生化活性的异常,经筛选有9条差异表达的micro RNA与基因芯片结果相一致,其中上调表达的有8条而下调表达的有1条,痔血宁合剂可以对这九条micro RNA中的八条起到明显的转录调控作用。
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