60Co-γ射线及化学诱变剂对刺梨诱变效应的研究

来源 :贵州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ktyl2000
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刺梨作为我国特有的新兴果树,因其果实含有丰富的营养物质和药用保健成分,特别是极高的维生素C含量而引起国内外广泛关注,现已成为贵州省重点发展的果树产业,其栽培面积逐年扩大。但因现有刺梨品种单一,远远不能满足加工产业及市场对刺梨品种的多元化需求,在一定程度上限制了刺梨产业的发展。因此,本研究采用60Co-γ射线和化学诱变剂对现有刺梨品种进行诱变处理,筛选出了诱变的适宜剂量,并通过形态学、细胞学及分子生物学手段对诱变材料进行鉴定,获得了一些遗传物质发生改变的材料,为刺梨新品种的选育奠定了材料基础。主要研究结果如下:1.利用60Co-γ射线对刺梨一年生扦插苗及休眠枝条进行辐照处理,结果表明:刺梨对60Co-γ射线较为敏感,仅能承受0~30 Gy范围内的剂量。当辐照剂量为10 Gy时,刺梨一年生扦插苗死亡率为5%,新梢发生分叉畸变率为7.94%,变异枝条长度、粗度均增大,而节间距缩短;诱变后的刺梨休眠枝条扦插成活率为25.25%,且8%的枝条叶片发生畸变,变异叶片单叶、复叶长与宽均极显著高于对照。与对照相比,辐射处理植株物候期明显推迟。2.以刺梨实生幼苗为试材,采用不同剂量60Co-γ射线对其进行处理。结果表明:随着辐照剂量的增加,刺梨幼苗成活率降低,当辐照处理剂量达到10 Gy以上时,幼苗成活率极显著降低,其半致死剂量介于15~20 Gy之间;同时幼苗地上部及根系生长受到严重抑制;叶片光合色素和淀粉含量随辐照剂量的增加而逐渐降低,且各处理间差异极显著;丙二醛含量随辐照剂量的加大而极显著增加;可溶性糖、可溶性蛋白质、游离脯氨酸含量都随着辐照剂量增加表现为先升后降趋势,其中可溶性糖及可溶性蛋白在10 Gy处出现峰值,而游离脯氨酸在15 Gy时含量最高。综合60Co-γ射线对刺梨幼苗的半致死剂量及生长、生理特性的影响,刺梨适宜辐照剂量在15~20 Gy之间。3.对‘贵农5号’刺梨离体快繁体系进行了优化,结果为:腋芽诱导最佳培养基为MS+0.5 mg.L-1 6-BA+0.2 mg.L-1 IAA,诱导率达91.1%;最佳继代增殖培养基为MS+0.25 mg.L-1 6-BA+0.05 mg.L-1 IAA+1.0 mg.L-1 GA3,其增殖系数达2.58;最适生根培养基为1/2 MS+0.2 mg.L-1 NAA+1.0 mg.L-1 IBA,其生根率为96.67%,平均根数5.67条。4、以不同浓度秋水仙素处理刺梨已萌发种子和单芽茎段,结果表明,刺梨种子诱变的适宜浓度及时间为0.1%的秋水仙素浸渍24或48 h;刺梨茎段诱变的适宜浓度及时间为0.2%的秋水仙素浸泡48 h。5、秋水仙素使部分刺梨组培苗形态和生理发生改变,主要表现为株高、节间距、复叶形指数变小,茎粗、叶面积、保卫细胞长度与宽度、气孔长度变大,同时气孔密度降低、叶片总叶绿素和类胡萝卜素含量升高等。6.利用SSR分子标记技术对通过辐射诱变和化学诱变发生形态变异的10株材料进行检测,其中辐射诱变的7株材料以及化学诱变的2株材料在谱带上均能与对照区分开来,表明诱变产生的形态变异材料发生了DNA水平上的变异。在具有多态性的引物扩增结果中,其谱带突变类型主要为“条带缺失型”和“混合型”。
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