缬沙坦对慢性病毒性心肌炎小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响

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心肌炎是威胁人类健康的常见疾病,是指心肌中有局限性或弥漫性的急性、亚急性或慢性的炎性病变可原发于心肌,也可是全身性疾病的一部分。病因有感染、理化因素、药物等,最常见的是病毒性心肌炎(VMC),其中又以肠道病毒,尤其是柯萨奇B病毒感染最多见。许多实验和临床资料提示病毒性心肌炎、扩张型心肌病(DCM)是一种疾病的两个阶段,VMC最终可转化为DCM。目的:本实验通过建立慢性病毒性心肌炎(CVMC)小鼠的动物实验模型,观察实验小鼠心脏结构、心功能的变化及观察慢性病毒性心肌炎小鼠外周血Th17和CD4+CD25+Treg细胞及其分泌的细胞因子的检测分析,以及探讨拮抗RAAS系统药物改变Th17/Treg平衡在慢性病毒性心肌炎的发生发展中的关系,以期为慢性病毒性心肌炎的心肌保护寻求更多更好的选择。方法:选42只4周龄Balb/c健康雄性小鼠随机分为正常对照组(n=6)、CVMC模型组(n=36)。CVMC模型组分别于0、14、28d腹腔接种0.2、0.25、0.3mlCVB3(TCID50:1O-4/0.1ml)共3次,正常对照组小鼠同期腹腔注射等体积生理盐水。42d时小鼠应用彩色多普勒超声显像仪,行心脏超声检查;包括心率(HR)、左室舒张末期内径(LVDD)、左室收缩末期内径(LVSD)、射血分数(EF)。自42d起,缬沙坦干预组均按100mg/(kg·d)灌胃给药,每日1次,共28d;CVMC对照组及正常对照组同予等体积生理盐水灌胃。70d时将所有小鼠使用无创血压测量仪测定心率、收缩压、舒张压。称重后摘眼球取血,ELISA法检测其血清AMA的表达。摘取小鼠心脏及脾脏,脾脏中提取Treg和Th17淋巴细胞,采用流式细胞术检测。心脏沿左室长轴分为两部分,一半置入10%中性甲醛固定后行HE、Masson染色,另一半采用RealTime-PCR技术,检测Treg及Thl7在小鼠心脏中mRNA的表达。采用SPSS17.0软件进行处理,数据均用X±s表示,多组均数间比较采用单因素方差分析方法;两组均数间比较采用LSD检验方法;p<0.05,为差异有统计学意义。结果:各组小鼠血压水平无显著性差异(P>0.05)。慢性VMC组小鼠心脏质量/体质量比(HW/BW)大于缬沙坦干预组和对照组(P<0.01),慢性VMC组小鼠脾脏中Th17细胞的比例、IL-17、病理积分明显高于缬沙坦组和对照组(P<0.01),而CD4+CD25+Treg细胞的比例、Foxp3低于缬沙坦组和对照组(P<0.05)。慢性VMC组小鼠心脏中Th17mRNA明显高于缬沙坦组和对照组(P<0.01),而CD4+CD25+TregmRNA(?)低于缬沙坦组和对照组(P<0.05)。缬沙坦组小鼠心功能较慢性VMC组明显改善。结论:病毒性心肌炎小鼠外周血中存在Th17/Treg失衡,且与心肌病变有相关性,缬沙坦可通过调节Th17/Treg平衡,减轻慢性VMC自身免疫损伤,避免向扩张型心肌病进展
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