喹诺酮类药物和人血清白蛋白的光谱分析研究

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本文主要研究了喹诺酮类药物司帕沙星、盐酸洛美沙星和人血清白蛋白测定的新方法,药物与染料、蛋白质与染料作用的光谱特性以及有关机理。 喹诺酮类药物与染料相互作用的光谱分析研究主要包括:(一)曙红B与司帕沙星相互作用的分光光度研究。在pH为2.0的Clark—Lubs缓冲溶液条件下,曙红B与司帕沙星复合物的最大吸收峰位于530nm,比曙红B本身红移16nm,复合物的表观摩尔吸光系数为4.98×103L·mol-1·cm-1。线性范围为10~50mg·L-1,检出限为5.4mg·L-1。实验显示静电引力作用是曙红B与司帕沙星结合的主要因素。(二)曙红B与司帕沙星相互作用的荧光光谱分析与研究。基于司帕沙星对曙红B的荧光具有猝灭的特性,拟定了一种测定微量司帕沙星的方法。在pH=3.5的Clark—Lubs缓冲溶液条件下,曙红B激发波长λex=308nm,发射波长λem=540nm,司帕沙星的浓度在0.2~4mg·L-1范围内呈良好线性,检出限为0.054mg·L-1。用该方法对胶囊中的司帕沙星进行回收,回收率为90~109%,相对标准偏差为1.2~2.8%。对猝灭机理进行初步讨论,认为主要是静态猝灭。求得司帕沙星与曙红B的结合常数为7.94×104,结合比为1.02。(三)曙红B与盐酸洛美沙星相互作用的分光光度研究。在pH为1.2的Clark—Lubs缓冲溶液条件下,曙红B与盐酸洛美沙星复合物的最大吸收峰位于535nm,比曙红B本身红移30nm,复合物的表观摩尔吸光系数为5.82×103L·mol-1·cm-1。方法的线性范围为10~40mg·L-1,检出限为2.2mg·L-1。 人血清白蛋白与染料相互作用的光谱分析研究主要包括:(一)曙红B与人血清白蛋白相互作用的分光光度研究。在pH为1.8的Clark—Lubs缓沖溶液条件下,曙红B与人血清白蛋白复合物的最大吸收在528nm,比曙红B红移14nm,复合物表观摩尔吸光系数为1.19~106L·mol-1·cm-1。在5~50mg·L-1浓度范围内呈线性关系,检出限为0.69mg·L-1。用摩尔比法求得表观最大结合比为200。(二)靛红与人血清白蛋白相互作用的分光光度研究。在pH为1.8的Clark—Lubs缓冲溶液条件下,人血清白蛋白与靛红结合使靛红的吸光度下降。在6~34mg·L-1浓度范围内,吸光度的降低与人血清白蛋白浓度呈线性关系。对人血清中的总蛋白进行了测定,结果满意。(三)四磺基金属酞菁类染料与人血清白蛋白相互作用的共振光散射光谱分析与研究。在pH为2.0的Clark-Lubs缓冲溶液条件下,人血清白蛋白与四磺基金属酞菁类染料结合而使体系共振光散射急剧增强并产生新的共振光散射光谱,共振光增强与人血清白蛋白浓度呈线性关系。表明四磺基金属酞菁类染料都可以作为共振光散射试剂测定人血清白蛋白。(四)四磺基铁(Ⅲ)酞菁与人血清白蛋白相互作用的二级散射和倍频散射光谱分析与研究。在pH为2.0的Clark—Lubs缓冲液中,人血清白蛋白与四磺基铁(Ⅲ)酞菁结合而使二级散射和倍频散射急剧增强。在0~2.3mg·L-1和O~3.4mg·L-1浓度范围内,二级散射和倍频散射的增强与人血清白蛋白浓度呈线性关系,检出限分别为o.40mg·L一’和0.16mg·L一‘。国酸性染料与蛋白质相互作用的倍频散射光谱分析与研究。在PH为3.0的Clark一Lubs缓冲液中,人血清白蛋白与曙红B、靛红和酸性品红等酸性染料结合而使体系倍频散射急剧增强。在0.1一1.lmgL一’、0.53.smg·L一‘和0.5nmg·L一‘浓度范围内,倍频散射的增强与人血清白蛋白浓度呈线性关系,检出限分别为0.070mg·L一‘、0.17mg’L一‘和0.24mg·L一‘。
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