【摘 要】
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背景腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）是终末期肾病肾脏替代治疗的主要方法之一,具有血流动力学稳定、操作简便、居家治疗等多种优点。目前,PD应用的主要为含不同浓度葡萄糖的腹膜透析液（peritoneal dialysis solution,PDS）,长期使用伴随许多并发症,其中以腹膜纤维化（peritoneal fibrosis,PF）最难处理,严重制约PD技术的发展及应用,因
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背景腹膜透析（peritoneal dialysis,PD）是终末期肾病肾脏替代治疗的主要方法之一,具有血流动力学稳定、操作简便、居家治疗等多种优点。目前,PD应用的主要为含不同浓度葡萄糖的腹膜透析液（peritoneal dialysis solution,PDS）,长期使用伴随许多并发症,其中以腹膜纤维化（peritoneal fibrosis,PF）最难处理,严重制约PD技术的发展及应用,因此PF的防治尤为重要。研究发现黄芩苷（baicalin,BA）具有拮抗肝、肺、肾等实质器官纤维化的作用,但其能否抑制人腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cells,HPMCs）纤维化仍有待证实。因此,本课题选取了与纤维化关系最为密切的血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor A,VEGF-A）和转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）,观察BA对它们的影响。目的观察BA对高糖腹膜透析液（high glucose peritoneal dialysis solution,HGPDS）诱导的人腹膜间皮细胞VEGF-A和TGF-β1表达的影响,为PD相关性PF的机制研究及治疗提供新的思路和探索。方法体外培养HPMCs,使用CCK-8法检测BA毒性,选取合适的药物浓度及刺激时间,将细胞分为以下5组:对照组、PDS组、低BA组（2.5μmol/L）、中BA组（5μmol/L）、高BA组（10μmol/L）;ELISA法检测各组细胞培养上清中VEGF-A和TGF-β1的含量;q RT-PCR法检测各组细胞中VEGF-A和TGF-β1的m RNA表达量;免疫荧光法检测各组细胞中VEGF-A和TGF-β1的蛋白表达量。结果1.当BA浓度过高时（＞10μmol/L）,会明显降低细胞活力,且随着作用时间的延长,细胞活力下降越明显。而在BA浓度相对较低时（2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L）,细胞活力无明显改变,但当作用时间达到48h时,细胞活力出现了轻微程度的下降（P＜0.05）。2.使用含HGPDS的混合溶液（葡萄糖含量约为88.5mmol/L）刺激HPMCs 24h后,细胞上清中的VEGF-A和TGF-β1含量明显高于对照组（P＜0.05）,而加入不同浓度BA（2.5、5、10μmol/L）后,细胞上清中VEGF-A和TGF-β1含量相较于PDS组均出现了一定程度下降（P＜0.05）,但无明显浓度依赖性,其中以中BA组（5μmol/L）下降最为明显。3.使用含HGPDS的混合溶液刺激HPMCs 24h后,细胞中VEGF-A和TGF-β1的m RNA表达水平明显升高,而BA各组细胞VEGF-A和TGF-β1的m RNA表达量均明显低于PDS组（P＜0.05）,但无浓度依赖性,同样以中BA组（5μmol/L）下降最明显。4.使用含HGPDS的混合溶液刺激HPMCs 24h后,细胞内VEGF-A和TGF-β1蛋白表达明显增加（P＜0.05）,而加入BA（5μmol/L）后,VEGF-A和TGF-β1的表达受到抑制。结论HGPDS可于体外诱导HPMCs中VEGF-A和TGF-β1表达增加,而此作用在一定程度上可被BA抑制。
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