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目的: 1、应用水痘-带状疱疹病毒(VZV)报告细胞系MV9G细胞从植物药成分中筛选具有抑制VZV作用的物质。 2、应用VZV报告细胞系MV9G研究槲皮素体外抑制VZV作用及其机制。 方法: 1、植物药成分的细胞毒性试验:MV9G细胞分别在含有丁子香酚、桑色素、姜黄素、杨梅酮和槲皮素的培养基中培养72 hrs后测定MV9G细胞的ATP含量，根据药物对MV9G细胞ATP含量的影响分析药物的细胞毒性，并计算植物药成分对MV9G细胞的半数致死浓度(CD50)。 2、植物药成分对VZV半数抑制浓度测定:MV9G细胞在含不同浓度药物培养基中与VZV感染细胞（含带细胞病毒CAVs，M.O.I.约为0.1）共培养48 hrs后收集细胞测定荧光素酶。通过观察不同浓度药物对病毒感染细胞激发MV9G细胞荧光素酶的影响分析药物对CAVs的抑制作用，并计算出植物药成分对CAVs的半数抑制浓度(IC50)。 3、植物药成分抑制VZV选择指数测定:通过所测药物的CD50和IC50计算植物药成分抑制VZV的选择指数(SI=CD50/IC50)，选择SI最高的植物药成分进一步研究其体外抑制VZV的作用机制。 4、在含槲皮素培养基中将300 pfu无细胞病毒(CFVs)直接感染MV9G细胞激发其表达荧光素酶，通过测定在CFVs直接感染MV9G细胞前预处理CFVs、或在CFVs直接感染MV9G细胞时改变孵育温度等条件下槲皮素对CFVs激发MV9G细胞荧光素酶表达的影响分析槲皮素直接灭活CFVs、抑制CFVs粘附和穿透MV9G细胞的作用。 5、在含槲皮素培养基中将CAVs与MV9G细胞共培养，通过测定不同时间点加入不同浓度槲皮素、或不同时间点撤除槲皮素时CAVs激发MV9G细胞荧光素酶的变化以分析槲皮素抑制CAVs在细胞内复制作用的浓度、时间点和可逆性。 6、通过比较槲皮素作用前后VZV即刻早期蛋白62(IE62)表达强度及其mRNA拷贝数的变化，分析槲皮素对VZV IE62基因转录和表达的抑制作用。 结果: 1、植物药成分的细胞毒性:槲皮素＞60.0μg/mL时MV9G细胞的ATPs含量随药物浓度升高而逐渐降低，ATPs降低50％时槲皮素浓度(CD50)约为102.9μg/mL。丁予香酚CD50约为64.5μg/mL，桑色素CD50约为254.8μg/mL，姜黄素CD50约为12.4μg/mL，杨梅酮CD50约为64.9μg/mL。 2、植物药成分对VZV的半数抑制浓度:在MV9G细胞与CAVs共培养时加入槲皮素后CAVs激发MV9G细胞荧光素酶显著降低，槲皮素抑制MV9G细胞荧光素酶50％时浓度(IC50)约为13.6μg/mL，丁子香酚、桑色素、姜黄素、杨梅酮的IC50分别为21.0、154.9、8.2和20.4μg/mL。 3、植物药成分抑制VZV的选择指数测定:根据所测植物药成分的CD50和IC50计算其选择指数(SI=CD50/IC50)，SI由高到低依次为:槲皮素(SI=7.6)＞杨梅酮(SI=3.2)＞丁子香酚(SI=3.1)＞桑色素(SI=1.7)＞姜黄素(SI=1.5)。 4、将CFVs与含槲皮素培养基预混至终浓度40.0μg/mL，4℃孵育0、30、60、90、120mins后直接感染MV9G细胞2hrs后弃接种物，继续培养48 hrs后收集MV9G细胞测定荧光素酶。槲皮素预处理各时间组与未经槲皮素处理组CFVs激发MV9G细胞荧光素酶无显著性差异。 5、MV9G细胞在含槲皮素（终浓度40.0μg/mL）培养基中直接感染CFVs，分别在4℃和37℃环境中培养2 hrs弃接种物，继续培养48hrs后收集MV9G细胞测定荧光素酶，CFVs在4℃和37℃时激发MV9G细胞表达荧光素酶无显著性差异。 6、MV9G细胞与CAVs共培养时，分别在第1、3、6、9、12、24、30和36hrs时加入槲皮素（终浓度40.0μg/mL），结果显示1hr、6～12hrs和30～36hrs加药组CAVs激发MV9G细胞荧光素酶显著低于对照组，但3hrs和24hrs加药组与对照组间差异无统计学意义。 7、MV9G细胞与CAVs共培养第24、48和72hrs后撤除槲皮素，撤除槲皮素后各组CAVs激发MV9G荧光素酶显著高于撤药前，尤以24hrs撤药组明显。 8、VZV IE62 mRNA拷贝数和IE62抗体阳性细胞数随槲皮素作用时间延长而逐渐将低。 结论: 1、槲皮素对MV9G细胞的毒性较弱，MV9G细胞可耐受槲皮素最高浓度约为60μg/mL。 2、槲皮素不能直接灭活CFVs。 3、槲皮素不能抑制CFVs粘附MV9G细胞。 4、槲皮素不能抑制CFVs穿透MV9G细胞。 5、槲皮素以浓度依赖方式可逆性抑制CAVs在宿主细胞内复制，半数抑制浓度为13.6μg/mL。 6、槲皮素可能通过抑制IE62基因的转录和表达而抑制VZV感染。