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目的：确定主要有关物质的化学结构，建立有关物质的HPLC检查方法，并对其进行方法学验证,以满足药物检查与新药审批需要。同时对无机杂质和残留溶剂进行检测。 方法：以合成工艺中的中间体、副产物以及降解产物为研究对象，结合HPLC法确定有关物质并对其进行了分离，利用NMR、MS、HSQC、HMBC等光谱法解析有关物质的化学结构。有关物质测定色谱条件：色谱柱：Inertesil ODS-2(4.6×250mm,5μm)；流动相：乙腈：水=55:45；流速：1mL/min；柱温：25℃；进样量：20μL；检测波长224nm。残留溶剂检查色谱条件：色谱柱：DB-1701（30m×0.32mm×0.25μm）；检测器：氢火焰离子检测器FID，FID检测器温度：250℃；进样口温度：220℃；检测器温度：250℃。柱温：程序升温，60℃保持5min,然后以10℃/min的速率升至160℃，再以20℃/min的速率升至240℃；载气：氮气，流速为1.32mL/min；分流比：20:1；溶剂：DMSO；直接进样法进样，进样量10μL；外标法检测。根据2010版药典方法对无机杂质进行检测。 结果：所建立方法专属性、耐用性以及方法学验证均符合要求。通过HPLC确定的含量范围超过0.05％的主要有关物质为，有关物质1：邻苯二甲酰肼（保留时间，2.5min），有关物质2：中间体Ⅲ，（四唑呔嗪，保留时间，6.0min）和有关物质3：合成反应中产生的副产物(6-(2,4-二氯苯氧基)-四唑并[5,1-a]酞嗪，保留时间，21.0min)，因有关物质1在后几批样品中含量低于检测限量，故不予报告只提供确定质量标准时的参考。有关物质2、3的影响因子分别为0.98、1.08，所以采用不加校正因子的自身对照法。本研究中规定杂质限量为：有关物质2在Q808中含量不超过0.08%，有关物质3的含量不超过0.07%，总有关物质不得超过1.5%；有机溶剂残留检查中的甲醇、二氯甲烷和甲苯均在含量限度范围内，并进行了方法学研究；本品氯离子杂质含量不超过0.02%，经检测工艺路线其可能含有硝酸根离子等杂质。干燥失重测定 Q808中失水量为0.4mg/g，未检出亚硝酸盐，炙灼残渣为0.022%。 结论：建立的方法简单可靠，可用于新药Q808有关物质、残留溶剂以及无机杂质的检测，以满足新药审批的需要。