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背景与目的胃癌(gastric carcinoma,GC)是人类常见的恶性肿瘤,GC患者中90%以上为胃腺癌(gastric adenocarcinoma,GAC),同时,GC因其侵袭性和转移性强,而成为对人类健康危害较大的恶性肿瘤之一。根据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)的统计研究,在世界范围内,GC的发病率排在人类常见恶性肿瘤的第五位,但由于其早期症状不明显,常常被误认为慢性胃炎(chronic gastritis)而延误诊断,往往发现诊断较晚,治疗结果不让人满意,死亡率高。人类罹患的癌肿中,GC病死率排在第二位。GC在亚洲国家高发是不可质疑的事实,尤其是在东南亚的日本地区,GC的发病率及死亡率更高,我国同样属于GC的高发国家之一,在我国的东部沿海及西北部地区GC的发病率及死亡率高于中国的南方地区,GC在我国的发病率大约是22.7/10万。尽管现在针对GC的手术方式和化疗方案已经相当规范,但总体的生存率和预后却仍不尽如人意。GC患者的不良预后可能与患者诊断时病程大部分在进展期有很大关系。GC的发生和发展是由于多种内部和外部因素共同作用的结果,但对其分子生物学行为我们知之甚少,针对GC发生和发展分子机制方面的研究具有十分重要的意义。酪氨酸蛋白激酶7(protein tyrosine kinase 7,PTK7),是一种缺乏催化活性的受体蛋白酪氨酸激酶(recepter protein tyrosine kinase,RTK),第一次是在结肠癌细胞系中发现的,因而曾经也被叫做结肠癌激酶4(colon carcinoma kinase 4,CCK4),是一个我们了解,研究较少,比较新的RTK家族的成员。PTK7的基因是由20个外显子构成,包括7个免疫球蛋白样子的环细胞外域,催化活性以及跨膜结构域的酪氨酸激酶域。目前研究发现,PTK7是PTK7/Otk的一个具有多功能的共同受体。在急性髓细胞性白血病,结肠癌,肺癌,食管鳞状细胞癌中高表达,在肝癌,头和颈部的鳞癌以及卵巢癌中也都有异常表达。研究表明,PTK7与肿瘤的发生有密不可分的关系。迄今为止,PTK7的表达与GAC的关系在国内的报道较少。本文通过免疫组织化学(Envision法)和RT-PCR检测GAC组织中PTK7的表达与正常组织PTK7的表达差异,并探讨GAC中PTK7的不同表达情况与GAC患者临床病理特点间的关系。Kaplan-Meier法(又称K-M法)和Log-rank检验行生存分析。分析GAC患者3年生存率,3年复发率以及GAC患者3年生存率之间的差异。进一步研究PTK7在GAC的发生,发展,转移以及侵犯等方面所扮演的角色,为GAC的诊断治疗提供帮助。材料与方法1.标本采集和研究对象收集郑州大学第一附属医院普外科胃肠方向GAC患者手术标本及30例癌旁组织。2011年1月1日至2011年12月30日期间进行D2或D3标准胃癌根治术。研究对象均接受了标准的淋巴结清扫;均按照指南行术前常规辅助检查,所有患者在进行D2或D3标准胃癌根治手术之前未曾接受过化放疗、中医和西医治疗等,术后标本经2名及以上资深专家证明为GAC。患者知情并签字同意,医院和学校伦理委员会书面批准。标本离体后30min内无菌条件下清理血污,切除标本,避开腐烂坏死组织,新鲜腺癌组织大小约1.0cm*1.0cm*1.0cm,位于癌肿中心位置,正常的胃黏膜组织取自胃的残端或者是距离肿瘤边缘8cm以外组织,术后均一样经过2名及以上病理学专家证实。标本收集后经浓度10%的福尔马林液体固定,后对正常胃黏膜组织以及GAC组织行常规石蜡包埋并切片,再将切片保存于实验冰箱中,待用。删失标准:术前曾经接受过介入手术治疗,放化疗等其他治疗,既往有消化系统恶性肿瘤史,本研究所有GAC患者均随访36个月以上,临床病理资料完整可查,GAC患者临床病理及病历资料从医院(郑大一附院)病历系统中获取。2.研究方法2.1采用IHC和RT-PCR检测PTK7在210例GAC组织及30例正常的癌旁组织中的表达2.2分析GAC患者的PTK7表达与临床病理资料(患者性别,年龄,肿瘤大小位置,Lauren分型,分化程度,浸润深度,有无转移)的关系。2.3分析GAC患者组织与正常组织中PTK7表达的差异2.4分析GAC患者PTK7阴性表达组与阳性表达组生存率及3年复发率的差异3.统计学处理本研究实验数据均使用SPSS17.0软件包进行分析处理。连续变量采用T检验,计数资料采用χ2检验和(或)Fisher确切概率法进行统计学分析,Kaplan-Meier法(又称K-M法)和Log-rank检验行生存分析。P<0.05则认为差异具有统计学的意义。结果1.GAC组织与正常胃黏膜组织,210例GAC组织中,PTK7表达阳性率为87.14%(183/210),阴性表达率22.86%(27/183),30例正常组织中PTK7阳性表达率为66.67%(20/30),阴性表达率为33.33%(10/30),差异具有统计学意义(P=0.012)2.210例GAC组织中,PTK7阴性表达与阳性表达与患者年龄(t=1.55,P=0.122),性别(χ2=0.437,P=0.508),肿瘤大小(χ2=0.004,P=0.947),位置(χ2=0.255,P=0.880)无关,与Lauren分型(χ2=6.640,P=0.011),分化程度(χ2=6.468,P=0.039),浸润深度(χ2=5.007,P=0.025),有无转移(P=0.034)相关3.PTK7阳性的GAC患者1年生存率为83.60%(153/183),PTK7阴性的GAC患者1年生存率为92.60%(25/27),差异具有统计学意义(χ2=4.465,P=0.035),3年生存率为39.89%(73/183),PTK7阴性的GAC患者3年生存率为62.96%(17/27),差异具有统计学意义(χ2=5.114,P=0.024);PTK7阳性的GAC患者3年复发率为34.43%(63/183),PTK7阴性的GAC患者3年复发率为14.81%(9/27),差异具有统计学意义(χ2=4.165,P=0.041)结论1.PTK7在GAC组织中的表达水平显著高于其正常的胃黏膜组织,PTK7的高表达与GAC的临床病理特征密切相关。2.PTK7可能成为评价GAC患者预后的指标3.PTK7可能成为潜在的GAC早期诊断分子标志物或治疗靶点。