决明子蒽醌苷对H2O2氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用

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决明子蒽醌苷是豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子的主要有效成分。具有清除自由基、抵抗氧化的作用。本文提取纯化了决明子蒽醌苷,并测定所提取决明子蒽醌苷粉末的纯度。选用离体人脐静脉内皮细胞HUVEC的H2O2损伤模型,分为四组:A正常对照组;BH2O2氧化损伤组;C决明子蒽醌苷低浓度组(0.1mg/ml);D决明子蒽醌苷高浓度组(0.4mg/ml)。从细胞活性、SOD和MDA含量、NO分泌量几个方面来探讨决明子蒽醌苷对氧化损伤的HUVEC的保护作用。为决明子蒽醌苷在治疗高脂血症和动脉粥样硬化的开发和应用提供实验依据。主要实验结果如下:  1、2kg决明干燥种子经提取纯化后得到决明予蒽醌苷0.957g,为棕色粉末,提取率为0.048%。以1,8-二羟基蒽醌为标准,测得决明了蒽醌苷含量为80.77%。  2、对照组的细胞存活率为100%;H2O2氧化损伤组的细胞存活率为48.27%±5.49%:蒽醌苷低浓度组细胞存活率为77.03%±4.24%;蒽醌苷高浓度组细胞存活率为81.95%±4.64%。氧化损伤组与对照组比较P<0.01,有极显著差异;C、D蒽醌苷组与氧化损伤组比较P<0.01,有极显著差异;C、D蒽醌苷组与对照组比较P<0.01,有极显著差异;蒽醌苷高浓度组与低浓度组比较,P<0.05,有显著性差异。  3、对照组的SOD含量为29.20±0.821U/ml,MDA含量为1.60±0.041nmol/ml;氧化损伤组的SOD含量为23.72±0.269U/ml,MDA含量为4.08±0.319nmol/ml;蒽醌苷低浓度组的SOD含量为24.71±0.645U/ml,MDA含量为3.52±0.327nmol/ml;蒽醌苷高浓度组的SOD含量为25.82±0.275U/ml,MDA含量为3.39±0.369nmol/ml。氧化损伤组与对照组比较P<0.01,有极显著差异;蒽醌苷低浓度组与氧化损伤组比较P<0.05,有显著差异;蒽醌苷高浓度组与氧化损伤组比较P<0.01,有极显著差异;C、D蒽醌苷组与对照组比较P<0.01,有极显著差异;蒽醌苷高浓度组与低浓度组比较,P<0.01,有极显著性差异。  4、对照组的NO含量为57.17±2.934μmol/1;氧化损伤组的NO含量为44.21±1.446μmol/1:蒽醌苷低浓度组NO含量为47.19±1.022μmol/l;蒽醌苷高浓度组NO含量为49.15±1.020μmol/l。氧化损伤组与A组对照组比较P<0.01,有极显著差异;C、D蒽醌苷组与氧化损伤组比较P<0.01,有极显著差异;C、D蒽醌苷组与对照组比较P<0.01,有极显著差异;蒽醌苷高浓度组与低浓度组比较,P<0.01,有极显著性差异。  结论:  1、H2O2氧化损伤后细胞活性显著下降;决明子蒽醌苷可能能提高H2O2氧化损伤后的HUVECs的细胞活性;0.4mg/ml比0.1mg/ml决作用更强;但是决明子蒽醌苷不能将H2O2氧化损伤后的HUVECs的细胞活性提高到损伤前水平。  2、H2O2氧化损伤后的HUVECs的SOD活性显著下降,MDA含量显著增加;决明子蒽醌苷可能能提高H2O2氧化损伤后的HUVECs的SOD活性,降低MDA含量:0.4mg/ml比0.1mg/ml决明子蒽醌苷效果更佳;但是决明子蒽醌苷不能将H2O2氧化损伤后的HUVECs的SOD活性和MDA含量恢复到损伤前水平。  3、H2O2氧化损伤后的HUVECs的NO分泌量显著降低;决明子蒽醌苷能提高H2O2氧化损伤后的HUVECs的NO分泌量;0.4mg/ml的剂量优于0.1mg/ml;决明子蒽醌苷不能将H2O2氧化损伤后的HUVECs的NO分泌量提高到损伤前水平。
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