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奶花芸豆作为新疆特色农作物之一,是一种难得的高钾、高镁、低钠食品,尤其适合心脏病、动脉硬化、高血脂、低血钾症和忌盐患者食用。目前对奶花芸豆的研究主要集中在简单加工及理化性质测定等方面,缺乏深加工技术,资源利用率低,因此,如何充分利用奶花芸豆,提高其附加值,已成为奶花芸豆产业发展中亟待解决的问题。α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)是一种糖苷水解酶抑制剂。它主要通过抑制唾液及胰α-淀粉酶的活性,来阻碍人体所食用的淀粉及其它碳水化合物的消化和吸收,在不影响其他营养物质吸收和代谢的同时,减少糖分的摄取,降低脂肪的合成,起到降糖、减肥的作用。目前α-AI被广泛利用在医学、药学、农业等领域,可用来防治糖尿病、高血脂、高血压,也可作为抗虫基因被制成生物药剂,具有广阔的应用前景。凝集素(Lectin)是一种含有一个或多个能够特异性识别并可逆性结合单糖或多糖的一类非免疫原性、非酶本质的蛋白质或糖蛋白,广泛分布在自然界的有机体中,目前,从动物、植物、微生物、病毒及真菌中都已经得到分离,并可将其利用于细胞凝集、诱导细胞凋亡、抗真菌、免疫调节、抗肿瘤、促进有丝分裂、及生物固氮力等方面。本实验以新疆奶花芸豆为原料提取α-AI和凝集素,并对其进行初步的分离与鉴定,结果表明:(1)利用响应面软件对浸提液体积(A)、pH值(B)、浸提时间(C)、浸提温度(D)4个因素进行优化,确定奶花芸豆α-AI在浸提液体积200 mL,pH 3.5,浸提时间2.3 h,浸提温度43℃条件下抑制活性最高。粗提液经过20%~60%的硫酸铵分级沉淀,进行Sephadex G-50凝胶层析和DEAE A-50阴离子交换层析。纯化后的奶花芸豆α-AI抑制率达到(94.73±0.52)%,纯化倍数为1.15。利用SDS-PAGE电泳确定目标分子量在17 kDa左右,并通过LC-MS/MS检测确定分离的蛋白即为奶花芸豆α-AI。(2)利用响应面软件对料液比(A)、pH值(B)、提取时间(C)3个因素进行优化,确定奶花芸豆凝集素在料液比(g/mL)1:13,pH 7.4,提取时间18.5 h,条件下特异性活力最高。粗提液经过30~70%的硫酸铵分级沉淀进行Sephadex G-50凝胶层析和DEAE A-50阴离子交换层析。纯化后的奶花芸豆凝集素特异性活力达到(59.93±0.31)×10~3 HU/mg,纯化倍数为4.52。利用SDS-PAGE电泳确定目标分子量在31 kDa左右,并通过LC-MS/MS检测确定分离的蛋白即为奶花芸豆凝集素。