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随着我国养殖业的快速发展,因畜禽粪便引起的环境污染问题日益严重,堆肥法作为处理养殖业畜禽粪便重要手段之一而备受关注。本文针对我国传统堆肥中有益土著微生物较少,导致发酵速度慢,腐熟时间长的现状,采用PCR-DGGE等分子生物学技术研制微生物复合菌剂,用于加速堆肥腐熟进程和缩短堆肥所需时间。本论文选择养殖业废弃物中牛粪作为研究对象,制作微生物复合菌剂,并考察复合菌剂对牛粪堆肥腐熟度的影响,主要内容有：1.通过建立普通新鲜牛粪堆肥并检测堆肥的理化指标发现,温度55℃以上共持续6d,最高温度达到61.3℃；牛粪含水率由63.74%下降至46.65%；堆肥过程中pH值呈现弱碱性(8.0～9.0)；堆肥过程中碳氮比(C/N)呈现下降趋势。综合分析温度、含水率、pH值和C/N四项指标说明建立的普通新鲜牛粪堆肥符合堆肥一般变化趋势,此牛粪堆肥选取的堆肥样品可以作为筛选中温期及高温期微生物的来源。2.利用普通培养基培养微生物,并通过16SrDNAPCR扩增、测序确定微生物所属种类,获得27株微生物：假单胞菌属(Pseudomonas)2株、芽孢杆菌属(Bacillus)15株、纤维单胞菌属(Cellulomonas)2株、链霉菌(Streptomyces)2株、高温放线菌(Thermoactinomyces)4株、诺卡菌(Nocardia)1株、小单孢菌(Micromonospora)1株；通过PCR-DGGE技术分析堆肥中温期和高温期的优势微生物,最终选取纤维单胞菌属(C)2株、芽孢杆菌属(B.)8株、链霉菌(S)1株、高温单胞菌(Thermomospora)1株共12株优势微生物作为制备微生物复合菌剂的菌种。3.以筛选获得的12株优势微生物等体积混合均匀制成微生物复合菌剂并于0.73%比例加入牛粪堆肥中。结果表明,接种微生物复合菌剂的实验组比空白对照组能够促进堆肥温度快速上升,提前1d进入高温期(>55℃)且最高达到64.7℃；实验组在第22d其种子发芽指数(GI)达到86%,高于对照组的73%,表明接种复合菌剂有助于堆肥腐熟进程的加速,缩短堆肥时间,加快植物毒性物质的分解速度；同时实验组可以提前1d灭活牛粪中的大肠菌群。综合检测结果表明：在堆肥中接种一定量的微生物复合菌剂,可以促进堆肥快速升温,加快粪便中的有机质降解和堆肥腐熟进程,缩短堆肥时间,有利于畜禽粪便的无害化和资源化处理。