【摘 要】
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目的:明确抑癌基因ARHI在人胃癌细胞株及组织标本的表达情况,并统计分析其表达异常与胃癌患者临床病理特征之间的相关性;初步研究ARHI基因在胃癌细胞中的功能,从而为更深入的研究
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目的:明确抑癌基因ARHI在人胃癌细胞株及组织标本的表达情况,并统计分析其表达异常与胃癌患者临床病理特征之间的相关性;初步研究ARHI基因在胃癌细胞中的功能,从而为更深入的研究和早期胃癌的基因诊断及分子靶向治疗提供新的思路和理论依据。
材料方法:本研究通过收集胃癌手术新鲜标本、石蜡标本及培养不同分化程度胃癌细胞株,利用半定量RT-PCR,Western-blot,免疫组化,MTT,Transwell及流式细胞分析术等方法在mRNA和蛋白水平,从细胞到人体组织,对胃癌中ARHI基因的表达进行多层面多方法的研究验证。同时利用体外培养的MKN-28胃癌细胞初步研究了ARHI基因在胃癌中的功能。
结果:在细胞层面,从mRNA和蛋白水平检测发现,ARHI基因在不同分化程度的人胃癌细胞系及正常人胃粘膜上皮细胞之间均存在表达差异,ARHI表达量随细胞分化程度的升高而增加,两种实验方法检测结果基本一致。在组织层面的验证与细胞实验基本一致,即ARHI基因在多数胃癌组织标本表达下调或缺失,而在相应正常组织标本相对高表达;ARHI蛋白表达与肿瘤的分化程度及TNM分期有关(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位、大小、大体类型、是否淋巴结转移等均无明显统计学差异。经MTT、Transwell小室以及流式细胞术的方法检测表明,在MKN-28高分化胃癌细胞中ARHI基因干扰后细胞增殖、迁移及抗凋亡能力均较空载PU6质粒的细胞增强。
结论:ARHI基因在人胃癌中存在表达下调或缺失,其在胃癌中也发挥抑癌基因功能。
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