联合应用三氧化二砷和TRAIL诱导白血病细胞株凋亡的实验研究

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实验背景:凋亡是多种疾病的起因,白血病的发生部分是因为变异细胞的生命时间延长所致。大量的实验数据证明以凋亡为靶向治疗白血病为一种有效的方法。TRAIL是一种有潜力的凋亡诱导试剂,可以体外诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常组织细胞仅有极少或没有毒副作用。三氧化二砷亦是凋亡诱导药物的一种,目前已成功应用于治疗急性早幼粒细胞白血病,低浓度下诱导白血病细胞分化,高浓度下诱导白血病细胞凋亡,并且仅有极低的细胞毒性。目前已有试验尝试应用三氧化二砷诱导其他白血病细胞凋亡,但效果并不理想。因TRAIL与其他化疗药物联合应用有协同诱导凋亡的作用,我们将二者联用,观察其对白血病细胞株的凋亡诱导作用。实验目的:研究TRAIL和三氧化二砷能否协同抑制白血病细胞株的细胞活性及协同诱导白血病细胞株凋亡。实验方法:收集对数生长期的NB4、K562、Jurkat和U937细胞,调整细胞悬液浓度,分于96孔板,每孔200μl,100000个/孔。分为ATO组(细胞+ATO),TRAIL组(细胞+TRAIL),ATO+TRAIL(细胞+ATO+TRAIL)。置37℃、5%CO2温箱培养培养24小时。应用MTT法测细胞增殖情况。收集对数生长期的NB4、K562、Jurkat、和U937细胞,配成1×10~6/ml的细胞悬液,分别加入ATO、TRAIL、ATO+TRAIL培养24h时收集细胞。应用annexinV法测细胞凋亡。实验结果:除U937外,三氧化二砷对各组细胞的活性均有抑制作用:TRAIL对各组细胞的活性均有抑制作用;二者合用可以协同抑制细胞活性和诱导凋亡。实验结论:TRAIL和三氧化二砷能协同抑制白血病细胞株的细胞活性及协同诱导白血病细胞株凋亡。
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