神经干细胞移植治疗脊髓损伤的实验性研究

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目的:探讨新生24小时以内大鼠神经干细胞(NSCS)移植对脊髓损伤大鼠的神经功能的修复作用。方法:取新生24小时大鼠的脑组织分离海马组织中的NSCs,在体外培养并鉴定。制作脊髓损伤(SCl)模型,在脊髓损伤区将标记好的BrdU在伤后7天进行移植,脊髓损伤模型分为三组:A组,损伤组,脊髓损伤后自然恢复;B组,N.S移植组;C组,神经干细胞移植组,脊髓损伤后7天.A.B.C三组损伤前及伤后6天、14天、21天、30天、60天时分别行后肢BBB行为学评分,伤后60天处死实验动物行病理学检查及免疫组织化学染色,观察移植NSCS在大鼠体内的存活、迁移及分化情况。结果1.新生24小时大鼠海马中的NSCS可以在体外分离、培养及传代,nestin染色阳性,证实是NSCS。2.后肢BBB运动功能评分:SCI后6天,A.B.C三组评分无显著差异(P>0.05);伤后14天,A组评分高于B.C两组(P<0.05),B组和C组比较无显著差异(P>0.05);伤后21天,A组和C组行为学评分高于B组(P<0.05),A组和C组比较无显著差异(P>0.05);伤后30天,C组行为学评分最高,其次A组,B组最差,有统计学意义(P<0.05);伤后60天,结果与伤后30天一致。表明NSCs移植组的行为学评分比其它两组有显著改善。3.病理学和免疫组化表明,C组脊髓内可见BrdU染色阳性的细胞,表明NSCs可在宿主体内存活;C组脊髓损伤处发现BrdU+NSE、BulU+GFAP免疫组化双染阳性细胞,表明NSCS在宿主体内可以分化为神经元和星形胶质细胞。结论:新生24小时大鼠的NSCS可以在体外分离、培养及鉴定。神经干细胞移入脊髓损伤模型体内可以存活,分化为神经元和神经胶质细胞
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