阻断草鱼人工感染水霉途径的研究

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1水霉孢子入侵鱼体过程与方式的研究寄生水霉(Saprolegnia parasitica)是一种影响严重的鱼体病原菌,在世界范围内造成了重大的经济损失。本实验采用鱼类水霉病人工感染方式,对草鱼进行寄生水霉ATCC200013人工感染,通过石蜡切片和HE染色进一步研究水霉对鱼体皮肤组织病理性损伤,并且利用扫面电镜观察水霉菌丝在草鱼表皮的附着,进而探讨水霉入侵鱼体的方式与过程;研究结果表明:水霉孢子可以以单个或聚集的形式对鱼体造成不同程度的损伤,进而入侵鱼体,向鱼体体内萌发菌丝,汲取营养,而后向体外分生外生菌丝。2壳聚糖对草鱼人工感染水霉的影响壳聚糖有促进伤口愈合的作用被广泛用于畜牧及人医药等领域,而有关壳聚糖对鱼类的作用,如对鱼类疾病有无预防、治疗效果的研究很少,就其在促进鱼类伤口愈合、预防水霉病等作用方面的研究还未涉及。因此,我们用不同浓度壳聚糖浸泡受伤草鱼验证壳聚糖对鱼体伤口愈合的作用,结果发现:壳聚糖浓度≥25mg/L时,对草鱼伤口愈合效果显著,且伤口表面附有粘液;分别采用感染水体中添加25mg/L的壳聚糖以及感染前用25mg/L的壳聚糖浸泡受伤草鱼3d,结果表明:草鱼人工感染水霉的感染率均降低。而感染前用壳聚糖浸泡受伤草鱼,感染率相对更低。本实验验证促进鱼体伤口愈合可阻断水霉感染鱼体,为控制鱼类水霉病提供理论依据。3硫酸铜对水霉菌丝及孢子形态影响的研究不同金属离子对水霉产孢的影响不同,Cu2+的毒性最强,0.l mg/L时就有影响。从而选用硫酸铜作为研究药物,利用扫描电子显微镜技术研究了不同浓度硫酸铜对寄生水霉的菌丝与孢子形态学结构的影响,从而推断药物对水霉菌丝与孢子抑制的作用机理。硫酸铜处理后,菌丝产生不规则分枝,菌丝体会出现顶端膨大、肿胀、枝体干瘪等现象,最终导致其停止生长;孢子破裂、皱缩,无法萌发形成菌丝。4硫酸铜对草鱼人工感染水霉的影响在水产养殖中,Cu2+对抑制藻类生长、杀灭寄生虫、防治真菌性疾病有较好的效果。不同金属离子对水霉产孢的影响不同,Cu2+的毒性最强。这些数据只局限于不同药物与Cu2+抗真菌效果的一个对比。本实验研究了硫酸铜对水霉菌丝与孢子的影响。研究结果表明硫酸铜浓度≥0.5mg/L时可抑制水霉菌丝的生长;随着硫酸铜浓度的升高,初始游动孢子释放时间延长,且量逐渐减少;当硫酸铜浓度≥1.0mg/L时,水霉菌丝不释放游动孢子;分利用分光光度计与血球计数板测定孢子量,两种方法显示出了较高的一致性;随着时间推移,不同浓度硫酸铜中孢子数也随之增加,不同实验组,孢子数增加程度不同;硫酸铜浓度≥0.1mg/L时可抑制孢子数量的增加,同时可相应减少孢子悬液中的孢子量;另外,0.5mg/L的硫酸铜可降低草鱼人工感染水霉的感染率。本实验证明抑制水体中的孢子,可阻断水霉感染。
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