【摘 要】
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为了确定林烟草(Nicotiana sylvestris)抗病N’基因抗烟草花叶病毒(TMV)的信号调控途径,本论文研究了PAD4、EDS1、Rar1、SGT1、NPR1、Jar6、COI1和CTR1等8个信号元件编码基因
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为了确定林烟草(Nicotiana sylvestris)抗病N’基因抗烟草花叶病毒(TMV)的信号调控途径,本论文研究了PAD4、EDS1、Rar1、SGT1、NPR1、Jar6、COI1和CTR1等8个信号元件编码基因转入林烟草后,寄主的抗性表现,获得的主要结果为：1.通过Trizol法从林烟草叶片中提取总RNA,利用反转录克隆了林烟草的以上8个基因片段。2.通过酶切、连接和转化,分别将上述8个基因的反向互补序列连入用植物表达载体pCAM2300-35s-OCS构建了RNAi植物表达载体。3.分别转化入农杆菌LBA4404,利用叶盘转化法通过组织培养获得再生植株,经检测除Rar1基因外7个基因已转入林烟草。4.摩擦接种TMV-T1病毒于部分叶片上后,仅转Jar6基因植株与野生未转基因植株表现不同,即在接种叶片上出现了枯斑症状,在未接种叶片上出现花叶症状,而转其他基因的植株与野生型表现相同,即均出现枯斑,说明林烟草N’基因的信号原件编码基因Jar6基因被沉默,病毒未得到限制而从接种叶片扩展到未接种叶片上。
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