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猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种高度接触性传染病,接种疫苗是应对国内猪瘟疫情不间断流行与爆发的主要措施。由于传统CSFV生产工艺过程繁琐、生产周期长,难以在较短周期内满足质量稳定、数目庞大的猪瘟疫苗的需求。开发与优化基于低血清微载体悬浮培养体系生产ST细胞源CSFV的工艺,能在提高生产效率的同时显著降低成本,是未来大规模生产细胞源猪瘟疫苗的重要方向。本文首先使用DoE对6种低血清（1%FBS）培养基进行混料实验,与DMEM+10%FBS相比,筛选出的Low Serum Medium （LSM）能以更高的比生长速率(0.626 d-1)连续稳定传代。进一步考察微载体浓度与细胞接种密度对ST细胞生长的影响。结果表明,3 g/L微载体用量与3×105 cells/ml细胞接种密度既能提供充足的贴壁面积,同时微载体利用率达到44.4%,培养13天细胞扩增了8.80倍,最高细胞密度达到（2.94±0.30）×106 cells/ml。理论计算搅拌转速后,在3 L Sartorius生物反应器中设定搅拌转速为5 rpm培养ST细胞最高密度达到27.7×105 cells/ml。其次,在病毒增殖阶段对基于LSM的方瓶体系CSFV生产工艺进行研究。结果表明,以RT-q（?）R检测病毒基因拷贝数为指标,方瓶体系LSM收获病毒（26.68±0.73）×107copies/ml,总量是DMEM的1.90倍。但兔体定型热免疫结果显示,LSM毒样均低于50万倍免疫效果,产生的CSFV可能在抗原结构上存在缺陷。进一步对培养过程中急剧变化的pH进行调控,不同的pH调节方式均能显著改善pH,但病毒产量没有显著提高。对CSFV同样有重要影响的温度及冻融次数的研究发现,37℃与35℃条件下孵育CSFV4天最终含量相差5.6%反复冻融5次CSFV病毒量即下降50%。再次在搅拌瓶体系考察不同MOI、TOI及（?）歇搅拌模式对病毒产量与单位细胞产毒能力的影响,结果表明TOI为120 h以15%(v/v（?）OI接毒能达到最高CSFV产量为（4.55±0.46）×107 copies/ml,兔体定型热检测能到达50（?）倍免疫效果。低于15%MOI接毒时,CSFV不能有效利用高细胞密度进行复制扩增,（?）I达到30%对细胞维持负面影响过大。此外,不同MOI病毒产量均随TOI的延迟而增加,在细胞生长平台期接毒更有利于CSFV在短时间内的快速复制。接毒后12 h内设置每20 min停10 min的间歇搅拌模式对CSFV增殖有促进作用。最后,在搅拌瓶体系在4（?）3天全换液条件下,收获的毒样均只有第一收病毒达到RT-qPCR与50万倍兔体定型（?）指标,其他几收病毒含量均随着收毒次数的增加而逐渐减少。理论计算搅拌瓶50 rpm条件下的溶氧限制很可能是其原因。通过本文研究,开发了适合ST细（?）贴壁生长的低血清培养基LSM,初步优化了细胞生长与病毒增殖相关参数,为大规模低血清微载体悬浮体系生产ST细胞源CSFV工艺的建立提供了基础数据。