海水鱼类主要病原弧菌致病性及外膜蛋白研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:glacier000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
海水养殖向高密度、集约化发展的同时,鱼类病害问题日益突出。其中弧菌病害是危害海水养殖鱼类最严重的细菌病害之一,许多弧菌可感染多种鱼类并造成大量死亡,本文主要对山东地区海水养殖场分离的致病弧菌进行了以下几方面的研究: 从自然发病大菱鲆体内分离到病原菌TL01,经生理生化鉴定和分子生物学鉴定为鳗弧菌;对从自然发病的鲈鱼、大菱鲆体内分离的病原鳗弧菌W-1、TL01及哈维氏弧菌SF-1的致病性研究表明,鳗弧菌W-1、TL01对牙鲆、大菱鲆有较强的致病性。W-1对牙鲆和大菱鲆腹腔感染的半数致死量LD50分别是2.06×104cfu/g和3.04×103cfu/g;TL01对牙鲆和大菱鲆腹腔感染的半数致死量LD50分别是5.09×104cfu/g和2.32×101cfu/g;哈维氏弧菌SF-1对牙鲆和大菱鲆腹腔感染的半数致死量LD50分别是9.65×103cfu/g和8.63×102cfu/g。 进行了鳗弧菌TL01、W-1抗血清制备,血清学实验表明,鳗弧菌W-1和TL01都属于O2血清型,哈维氏弧菌SF-1与鳗弧菌各血清型菌株之间无明显交叉反应。 对13株弧菌属的不同种的菌株、10个不同血清型的鳗弧菌标准菌株、9株哈维氏弧菌和4株副溶血弧菌的标准菌株的外膜蛋白分别提取并进行了分析;结果表明13株弧菌属的不同种的菌株外膜蛋白的SDS-PAGE图谱各不相同。不同菌种间主要的外膜蛋白有较大差异,一般有4-5条,分子量范围为25kD~70kD。 10种血清型的鳗弧菌的主要外膜蛋白的图谱各不相同。每个血清型的鳗弧菌标准菌株外膜蛋白有2-6条,分子量主要在25kD-70kD之间,但所有鳗弧菌均有1~2条主要外膜蛋白,分子量界于40kD和55kD之间,且在大部分菌株中其中一条的分子量在40kD左右。从当地分离的病原菌W-1和TL01最主要的外膜蛋白为40kD左右,另外还各有一条主要外膜蛋白带,分子量分别为53kD和44kD左右。 哈维氏弧菌菌株之间主要外膜蛋白的分子量相差比较大,没发现有各菌株间共同的主要蛋白,主要外膜蛋白有3-6条,分子量集中在30-48kD的区域。副溶血弧菌几株菌的外膜蛋白图谱总体比较相似,条带数比较多,一般多于3-5条,主中国梅洋大学硕士研究生论文要外膜蛋白分子量界于30kD一okD。 研究了不同培养基和培养条件对弧菌对外膜蛋白表达的影响,结果表明在缺铁基础培养基CMg中37℃条件下鳗弧菌W一1、TL01表达了一条分子量较小的主要外膜蛋白,分子量为35kD左右。 用SePhadex一G100、头phaeryl 5100凝胶层析和DEAE.SePharose Fast Flow、DEAE一纤维素层析对鳗弧菌W一1和TL01的主要外膜蛋白进行了分离,均未取得理想的分离效果。最后采用SDS-PAGE电泳分离后,直接在凝胶上切下目的蛋白,得到了电泳纯的鳗弧菌主要外膜蛋白,其分子量为35kD。 用鳗弧菌外膜蛋白以注射接种的方式对海水养殖大菱虾鱼苗进行免疫,4周后检测血清中特异性抗体,然后用鳗弧菌悬液(3 .7xl了cfu/ml)0.2ml腹腔注射感染免疫鱼,结果表明用鳗弧菌外膜蛋白免疫后能刺激大菱虾产生特异性免疫反应,免疫4周人工感染后的免疫保护力为45.45%。
其他文献
海参在分类上属于棘皮动物门中现存的六个纲之一的海参纲。全球大约有1200多种海参分别隶属于海参纲的六个目中。海参纲根据海参的形态特征如:触手的形状、管足和呼吸树的有无
本文对中国历史上以孟子、荀子、董仲舒、朱熹、王守仁等为代表的儒家后世代表人物的音乐思想,进行音乐传播视角下的解读,并探究其对孔子音乐传播观念的继承、发展与创新。上
佛罗里达的迪士尼乐园里主要的云霄飞车,最高点“只有”两百尺(约十五层楼高)。云霄飞车从十五层楼高的地方俯冲下来,很恐怖吧,怎么会说“只有”呢?  因为那座云霄飞车在2004年设计兴建时,别的地方早已经出现更高更刺激的版本了。俄亥俄州一座乐园里,云霄飞车的最高点达到什么程度?四百二十尺(超过一百米)!从四百二十尺俯冲下来,短短四秒,飞车就到达每小时两百公里的速度,那种加速的效率,任何顶级跑车都望尘莫
期刊
本文从“自我概念”这一社会心理学研究视角出发,探究生活在潮州的“畲族歌王”雷楚良的音乐行为与自我概念。从雷楚良生活的文化背景,到其在畲族山歌的学习、表演及传承等方
性别分化是一些诱导信号作用下性别决定基因选择性地表达的结果。温度和外源性激素是生产上诱导单性鱼常用的手段。为了了解温度、17α-甲基睾丸酮(17α-methyltestosterone,
层序地层学自上个世纪80年代形成完整的理论体系,在地学领域中的成功应用,体现出了其重要的理论价值及实际应用意义。自从引入到海洋地质学范畴中,地层的高分辨率研究即取得了突
大菱鲆是一个经济价值很高的养殖品种。自从20世纪90年代被引入中国后,大菱鲆的养殖得到了很快的发展。近年来,养殖环境的不断恶化,使得大菱鲆的各种疾病不断发生;病毒性出血病便
在当前语文“是什么”的讨论中,有质疑“语文”名称的,有主张“母语”代替语文的,有主张列“国学”于语文中,或让“国学”独立为课程的。这些主张或有违逻辑,或有违课程与学
明前茶是他的初恋寄来的。时间还在3月里,日光金贵,特别是在一个暖洋洋的午后。他从快递小哥手里接过包裹,看了地址,却没有急着拆开,只是端正地摆在桌上的一簇阳光里。  蓝眼睛的波斯猫是去年夏天意外捡来的。一场暴风雨过后,小家伙蜷在他的窗外喵喵直叫,他开窗将它迎了进来,用一条长浴巾为它拭去了浑身的水湿——它的蓝色眼睛是海洋的结晶,他望了一眼,便沉醉其中。  大概4年前,他的第一本小说出版,她读到后,通过
期刊
做好党和国家的各项工作,领导班子是关键。加强领导班子建设历来为我们党以毛泽东同志为核心的第一代中央领导集体、以邓小平同志为核心的第二代中央领导集体所重视。江泽民