口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起猪、牛、羊等偶蹄动物的一种烈性传染病,严重危害畜牧业生产,对国民经济造成巨大的经济损失。目前传统疫苗在FMD预防控制中仍占主导地位,但因生产成本昂贵、疫苗制备过程中病毒逃逸等潜在危险难以避免等因素,急需研制一种安全、高效的FMD分子疫苗。本研究利用家蚕/杆状病毒表达系统进行了O型FMDV组合基因的表达及AsiaⅠ型FMDV组合基因在不同家蚕品种中的表达差异分析,为利用家蚕生物反应器生产FMD分子疫苗提供参考依据。(1)选用OMⅢ株FMDV衣壳蛋白前体P1、非结构蛋白2A、3C,将其插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组质粒pVL-P12A3C,与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒Bm-P12A3C。通过免疫荧光技术证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将共转染后的重组病毒感染家蚕5龄幼虫,双抗体夹心ELISA法测定目的蛋白在家蚕血淋巴中获得了表达。对重组病毒进行筛选和纯化,将筛选后的重组病毒继续感染家蚕5龄起幼虫,用相同的方法进行检测,结果表明FMDV抗原在家蚕中获得了较高的表达。(2)选用了20个品种的家蚕蚕蛹,注射可以高效稳定表达FMDV AsiaⅠ型P1-2A3C基因的重组病毒,通过双抗体夹心ELISA方法检测目的蛋白在蚕蛹中的表达情况,并进行了差异分析。结果表明目的蛋白在各品种家蚕中的表达量存在一定差异,其中以9、10、12、14、15、17号等品种表达量相对较高。