左旋门冬酰胺酶对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖凋亡影响的研究

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目的研究左旋门冬酰胺酶对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株生长的影响,探讨左旋门冬酰胺酶可能的作用机制,为临床合理应用提供实验依据。方法取对数生长期的体外培养jurkat细胞,加入不同浓度的左旋门冬酰胺酶(L-Asp)处理细胞,通过倒置相差显微镜观察jurkat细胞经L-asp处理前后的生长状态变化,应用Gimsa染色于光学显微镜下观察L-Asp处理前后jurkat细胞的形态变化。通过琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度L-asp处理后的jurkat细胞的DNA片段。用流式细胞术检测jurkat细胞经不同浓度L-asp处理48小时后的凋亡率及死亡率。结果1.经L-asp处理后jurkat细胞集落形成明显减少,多呈单个悬浮生长,细胞体积大小不等,胞质空泡样变,核膜皱缩,胞核深染,染色质致密呈团块状。2.经终浓度为1IU/ml、2.5IU/ml、5IU/ml、10IU/ml的L-Asp处理48h后jurkat细胞DNA电泳均可见梯状条带,未处理组及经终浓度为0.1IU/ml的L-Asp处理48小时后的jurkat细胞DNA凝胶电泳未见梯状条带。3.终浓度为1IU/ml、2.5IU/ml、5IU/ml、10IU/ml L-Asp均可诱导jurkat细胞发生凋亡和死亡;L-Asp终浓度为2.5IU/ml时jurkat细胞凋亡率最高,死亡率随L-Asp浓度增高而升高。结论L-Asp可以诱导急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株发生凋亡。L-Asp诱导发生凋亡的jurkat细胞DNA片段化断裂,DNA片段电泳可见梯状条带。Jurkat细胞的凋亡率随L-Asp浓度不同而存在差异,死亡率随L-Asp浓度增高而增大,因此L-Asp浓度可能决定其临床的作用,是否可能通过凋亡诱导耐药,需进一步探讨。
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