猪流感病毒（SIV）不仅能感染猪和禽，而且能感染人。神经氨酸酶（NA）是流感病毒表面的一种重要蛋白质，在免疫和致病方面起重要作用。本研究在对SIV河南株生物学特性研究的基础上，对其NA基因进行克隆、序列分析并在杆状病毒表达系统中进行表达，从而为猪流感亚单位疫苗的研制、NA功能的深入研究及流感大流行的预测奠定基础。 从河南某猪场有呼吸道症状的猪群分离到1株H3N2亚型SIV。对其形态及生物学特性进行研究，结果表明：病毒粒子在透射电镜下呈多形态性，表现为杆状、丝状、椭圆形及圆形，直径大小为80-120nm；鸡胚半数感染量(EID₅₀)为10^-9.56／0.2ml，经鼻腔感染小白鼠，对小白鼠的半数致死量(LD₅₀)为10^-1.45／0.1ml；病毒血凝素为热不稳定型；能凝集0.7％马、牛、驴、猪、绵羊、鸡、兔、豚鼠、小白鼠及人O型血的红细胞。 通过RT-PCR扩增了NA基因的cDNA，克隆入pMD18-T载体。测序结果表明所扩增的cDNA含有完整的开放阅读框架（ORF），有1410个核苷酸，编码470个氨基酸。在www.flu.lanl.gov网站BLAST数据库中分析，与A／Guangzhou／333／99（H9N2）和A／Chicken／HongKong／G9／97（H9N2）NA基因的核苷酸同源率最高。对ORF内第1～1386位核苷酸进行比较，同源率分别为97.9％和96.3％，说明其进化关系密切，值得进一步研究。 HindⅢ酶切后，将NA基因亚克隆入转移载体pMelBacB。经PCR鉴定和HindⅢ、SalⅠ酶切鉴定后，重组转移载体质粒与线性化的杆一状病毒 DNA(B“－NE砒W DNA＼ C＊ di尸试剂共转染妞细胞。三轮噬斑纯化后，经PCR证实纯化的重组杆状病毒中己没有野生型杆状病毒。SDS－PAGE结果显示构建的重组病毒在sffi细胞中可高效表达NA基因，Western blot和神经氨酸酶活性测定表明表达的NA．有良好的兔疫原性和神经氨酸酶活性，本研究为猪流感亚单位疫苗的研制、NA功能的深入研究及流感大流行的预测奠定了基础。