基于磁性壳聚糖微球/硫堇的电化学生物传感器研究

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纳米材料因其优良的物理、化学性质,在生物电化学传感中得到了广泛应用。作为一种新型的纳米材料——磁性高分子纳米材料除了具有普通纳米材料的优良性质外,还具有独特的超顺磁特性和丰富的表面官能团,近年来逐渐在包括酶固定和电催化分析在内的许多研究领域得到了成功应用。本文的主要目的在于研究磁性壳聚糖微球对β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、多巴胺以及尿酸等生物活性小分子的电催化分析及其在生物传感方面的应用。其主要内容为:1.用碳包铁纳米粒子(CCINPs)和壳聚糖制备了磁性壳聚糖微球(MCMS),均匀分散后滴涂在聚硫堇(PTH)修饰玻碳电极上制备成MCMS/PTH修饰电极。用交流阻抗图谱(EIS)对MCMS/PTH/GCE进行了表征,利用循环伏安法考察了该修饰电极的电化学行为及其对β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的电催化作用,结果表明MCMS不仅能有效地修饰到PTH/GCE表面,而-MCMS和PTH对NADH的电化学氧化具有协同催化作用,与MCMS或PTH相比,MCMS/PTH具有较高的电催化活性,能使其氧化过电位降低超过570mV。优化了实验条件,考察了pH值、工作电位等因素对实验结果的影响。在优化条件下,利用稳态安培法可实现对NADH的定量分析。该NADH传感器的响应时间小于10s,在2-10μmol/L和10-100μmol/L两个浓度范围内,稳态安培电流与NADH浓度成较好线性关系,检测限为0.51μmol/L。此外,该传感器器还具有良好的选择性、稳定性和重现性,且可排除常见干扰物质的影响,并成功应用于NADH的定量分析。2.将磁性壳聚糖微球(MCMS)和硫堇(TH)混合超声后得到的修饰剂滴涂到玻碳电极表面,得到MCMS-TH修饰电极。用交流阻抗表征该修饰电极,循环伏安法研究多巴胺(DA)在修饰电极上的电化学行为。实验表明,在pH 5.5的PBS缓冲溶液中,DA表现出可逆性好的受扩散控制的电催化氧化行为,用循环伏安法测得扩散系数是2.63×10-5 cm2/s。实验考察了修饰剂用量、酸度、扫速、工作电位等因素对实验结果的影响,在优化条件下,在0.5-8.8μmol/L浓度范围内,稳态安培电流与DA的浓度成良好线形关系,相关系数是0.9991,检出限是0.12μmol/L。此外,修饰电极有高的选择性、稳定性和重现性,可用于抗坏血酸和尿酸同时存在时多巴胺的选择性测定,此电极用于盐酸多巴胺注射液样品的测定,取得较满意的结果。3.采用直接滴涂法制备了磁性壳聚糖微球-硫堇(MCMS-TH)修饰的玻碳电极。该修饰电极对尿酸(UA)和多巴胺(DA)有良好的电化学催化响应,可用于DA和UA混合溶液的同时测定。示差脉冲同时测定DA和UA的线性范围分别为2-30μmol/L和9-100μmol/L,检出限(S/N=3)分别为1.0μmol/L和4.3μmol/L。此外,抗坏血酸(AA)和其它一些常见干扰物质对该实验条件下的同时测定均无影响。该修饰电极具有良好的灵敏度、稳定性,可用于实际样品中DA和UA的测定,并得到满意结果。
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