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小麦是重要的粮食作物,利用植物基因工程技术进行小麦遗传改良,增强小麦抗病虫和耐逆境能力,提高产量,改善品质,是小麦遗传育种的一个新的方向。本研究以27份优良普通小麦(Triticum aestivum L.)主栽品种或高代育种品系,以及4份二倍体和四倍体小麦为试材,进行成熟胚愈伤组织诱导及分化再生的培养,比较其诱导及分化再生能力,研究影响愈伤组织形成及分化再生的因素(基因型、诱愈方式、2,4-D、ABA及KT浓度等),筛选小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化再生能力强的基因型,建立小麦成熟胚植株再生体系。对筛选出来的适合小麦成熟胚组织培养的基因型,利用建立的成熟胚植株再生体系,采用农杆菌(GV3101/pBI121::gus)介导对小麦成熟胚及其愈伤组织进行遗传转化,并对影响遗传转化效率的因素(转化受体的基因型、负压处理、侵染菌液的浓度、外植体预培养时间、侵染时间等)进行研究,确定选择剂的选择压力。同时,对以本实验室选育的小麦优良品系山农995604的胚性愈伤组织为材料,采用农杆菌介导将抗虫基因豇豆胰蛋白酶抑制剂基因CpTI转入小麦培养细胞,经筛选获得的抗卡那霉素再生植株,进行PCR和实时PCR以及PCR-Southern和Southern blot检测,并进行转化植株后代的CpTI基因遗传分析和抗虫鉴定。获得以下主要结果:1.小麦的基因型、成熟胚愈伤组织诱导方式、诱愈时的温度、光照、诱愈培养基2,4-D和ABA浓度及分化培养基KT浓度等,是影响小麦成熟胚愈伤组织形成和分化再生的重要因素。应用剥胚法(embryo-isolated method, EI)和整粒法(endosperm-supported method, ES)诱导成熟胚愈伤组织,并分别进行分化再生培养,在31份小麦品种(系)中筛选出了愈伤组织诱导率高、质量好、分化再生能力强、成苗率高的12个基因型,确定了每一基因型的最佳诱愈和分化再生途径,30～35 d即可获得大量再生植株。适合于剥胚诱愈的有TS021(分化培养基为MSF5)、HB188(MSF5)、SN2618(MSF5)、HB215(MSF5)、Yumai 54(MSF5)、T9817(MSF5)、T. dicoccum(MSF5)和SN03J102(MSF9);适合于整粒法的有4072(MSF1)、TS021(MSF3)、Yannong 19(MSF3)、HB341(MSF3)、Jinghua 1(MSF5)。在此基础上建立了较为优化和快捷的小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化再生体系,为小麦遗传转化的成功奠定了基础。2.接种菌液浓度及侵染时间、外植体预培养时间、负压处理、转化受体的基因型等因素,对小麦成熟胚遗传转化有较大影响。不同基因型的转化受体,对相同农杆菌菌