[研究背景及目的]滋养细胞的侵袭是被许多细胞因子紧密控制复杂多变的过程。转录因子在滋养细胞的浸润过程起着重要的作用。但是目前对转录因子的下游效应基因,以及对其进行调节的上游细胞因子知之甚少。同源异型盒基因是一类重要的调控滋养细胞分化和形态发育的转录因子基因家族,其中HLX1基因与胚胎来源细胞和造血系细胞的增殖、分化行为密切相关。1997年Quinn首次从人类胎盘cDNA文库中分离出来HLX1,发现其主要表达于具有增殖能力的细胞滋养层细胞。近年来研究陆续表明,HLX1基因在正常胎盘形成尤其是滋养细胞的增殖及分化中起起重要作用。病理妊娠如特发性胎儿宫内生长受限(FGR)的胎盘中HLX1基因表达水平明显降低。我们前期实验运用RNAi技术抑制滋养细胞株HTR-8／SVneo中HLX1基因的表达,发现滋养细胞的增殖和侵袭能力明显受到抑制。2007年Rajaraman等体外研究发现HLX1是集落刺激因子1(CSF-1)的一个下游效应基因,CSF-1可以通过上调HLX1基因的表达而促进滋养细胞的增殖。HGF是一种具有肝素结合特性的酸性蛋白质,妊娠妇女血清中的HGF主要来自胎盘,以旁分泌的途径作用于邻近的c-met受体,对内皮细胞和滋养细胞的功能进行调节。HGF能够保护滋养细胞发生凋亡、形态形成,促进滋养细胞对子宫螺旋动脉的浸润,是维持妊娠的必要因子。在本研究中我们猜测HLX1是HGF的下游效应基因,HGF通过对其调节进而对滋养细胞侵袭能力进行调节。[方法]1.复苏、培养人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞株HTR-8/SVneo至对数生长期,用不同浓度HGF(0、10、20、50、100 ng／mL)处理细胞48 h,设0浓度组作为对照组。2.用HLX1 siRNA转染细胞24 h后继续以20ng/mL HGF刺激48 h,分空白对照组(MCX、siRNA+HGF组、MC+HGF组3个实验组。3.应用实时荧光定量RT-PCR和蛋白印迹法测定各组细胞中HLX1 mRNA和蛋白的表达。4.应用明胶酶谱测定细胞上清中MMP-2、MMP-9的表达。5.细胞侵袭实验：应用Transwell小室检测转染后各组HTR-8/SVneo细胞穿透人工重组基底膜的能力。各组HTR-8/SVneo细胞以无血清培养液重悬并以相同数量接种于包被有Matrigel:基质胶的小室上室,下室加入20%FCS的培养液。继续培养24 h,40倍镜下随机取5个视野计数穿膜细胞数。6.统计学方法：应用SPSS 11.0软件包进行统计分析,以均数±标准差(x±s)表示定量资料数据,组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),认为P<0.05有统计学意义。[结果]1.HGF处理组细胞HLX1 mRNA表达水平与对照组比较上调了90%～475%(P<0.01),且与HGF呈剂量依赖性；20 ng／mL HGF使HLX1蛋白表达水平上调(156.7±6.4)%,P<0.01。2. siRNA+HGF组与MC组比较,细胞HLX1 mRNA和蛋白的表达水平分别下降(54.57±0.31)%及(68.44±2.48)%,P<0.01。3.20 ng／mL HGF处理组细胞其上清MMP-2表达水平与对照组比较上调(394.6±2.9)%, P<0.01; siRNA+HGF组与MC组比较MMP-2表达水平下降(81.5±0.6)%,P<0.01。4.20 ng／mL HGF处理的HTR-8/SVneo细胞穿过Matrigel的细胞数为(71±5)个,与对照组(50±3)个比较侵袭能力明显增强(P<0.01);siRNA+HGF组穿膜细胞数明显减少为(20±4)个,MC组为(43±3)个,两组之间有显著的统计学差异(P<0.01)。[结论]HGF可有效上调人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞HTR-8/Svneo中HLXl基因的表达,HLX1基因表达水平升高可以显著促进滋养细胞的侵袭能力。这表明HLX1是HGF的下游效应基因,它能调节滋养细胞的侵袭能力,HGF可以通过至少部分通过HLX1对滋养细胞侵袭能力进行调节。