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脑胶质瘤来源于神经上皮,是颅内最常见的原发性肿瘤,具有发病率高、复发率高、死亡率高和治愈率低的特点。目前技术条件下,脑胶质瘤特别是恶性程度高的脑胶质瘤的预后还很不理想。而肿瘤的抗血管生成治疗越来越引起人们的普遍关注,抗血管生成治疗是通过抑制血管的生成而阻断肿瘤细胞获得营养,从而达到有效抑制肿瘤生长和转移的目的。重组人血管内皮抑素(下文简称内皮抑素,endostatin)是目前临床效果比较好的一种抗肿瘤药,临床上主要用于初治或复治的Ⅲ/Ⅳ期非小细胞肺癌的治疗,但是对脑胶质瘤的治疗效果怎么样,目前还不是很清楚。故本实验拟通过研究内皮抑素对体外培养的神经胶质瘤细胞株增殖作用及VEGF和核仁素表达的影响,进一步为脑神经胶质瘤的临床治疗提供新的途径和理论依据。第一部分内皮抑素对胶质瘤细胞增殖的抑制作用目的研究内皮抑素对神经胶质瘤细胞株U251和C6增殖及迁移是否有抑制作用,并探讨它对神经胶质瘤的治疗及意义。方法体外培养神经胶质瘤细胞株U251和C6,不同浓度内皮抑素(10、20、30、40、50μg/ml)分别处理细胞48h,MTT法检测不同浓度内皮抑素对U251和C6的增殖作用的影响;20μg/ml内皮抑素作用细胞24、48h后,观察对细胞迁移作用的影响及细胞的形态学变化。结果不同浓度内皮抑素对U251和C6细胞的增殖均有不同程度的抑制作用并有浓度依赖性,最后选取20gg/ml作为内皮抑素后续的实验浓度。另外,内皮抑素对U251和C6细胞的迁移能力也有显著抑制作用。结论内皮抑素对体外培养的神经胶质瘤细胞株的增殖及迁移均有抑制作用。第二部分内皮抑素对胶质瘤细胞VEGF和核仁素表达变化的影响目的研究内皮抑素对U251和C6细胞中VEGF及核仁素表达变化,从而为内皮抑素对肿瘤的临床治疗提供实验基础和科学的理论依据。方法用免疫荧光标记检测U251和C6细胞中VEGF和核仁素蛋白表达以及20gg/ml内皮抑素分别处理U251和C6细胞24h和48h时VEGF表达变化;Westernblot检测两种细胞在内皮抑素处理不同时间核仁素蛋白表达变化。结果VEGF在两种细胞中都高表达,主要分布在包浆中;核仁素在两种细胞中也都有表达,主要表达在细胞核中,少量表达在胞浆和细胞膜上。内皮抑素可以下调U251和C6细胞中VRGF表达;而核仁素的表达则呈现先减少后增多的趋势。结论在体外内皮抑素可以下调胶质瘤细胞VEGF表达;另外对核仁素表达也有一定程度的影响,推测VEGF和核仁素在内皮抑素抑制胶质瘤细胞的增殖作用过程中起到一定的作用,但是其具体的作用机理目前还不太清楚。