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球花石斛D.thyrsiflorum已列入2005版《中国药典》。本文以球花石斛4个居群为材料,对其展开生态习性、形态特征和植物化学成分等方面的研究工作。以期为该种石斛药材原料提供质量标准,并为其引种、驯化、遗传育种和GAP种植提供有价值的理论依据。同时,运用高效液相的分析方法对云南36种石斛属植物中滨蒿内酯和泽兰内酯的相对含量进行检测。研究结果概括如下:
球花石斛为附生植物,生境独特,对小环境的要求十分严格。分布区气候温暖、雨量充沛。多附生于亚热带常绿阔叶林及温带常绿阔叶——落叶阔叶混交林中的乔木上。球花石斛兼有有性生殖和营养繁殖。有性生殖为虫媒异花授粉。种子粉尘状,数目巨大,可传播到较远的地方;营养繁殖以分蘖方式进行。
对球花石斛11个表型性状调查分析可知,居群平均水平的变异系数取值范围在15%-108%之间。各居群相比,鱼塘村居群(YT)的变异幅度最大,永庆村居群(YQ)相对较小。各龄相比,4龄茎的变异幅度最大,而2龄茎的变异幅度最小。不同采收年限茎的聚类分析结果差异较大。
对球花石斛的化学成分进行了研究。其全草通过溶剂提取、硅胶柱层析和SephadexLH-20柱层析等方法共分得8个成分。波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱、DEPT谱、NOESY谱、HMBC谱、HMQC谱、H-HCOSY谱和质谱等)鉴定了其中的6个化合物,它们结构分别为7-羟基-2-甲氧基-1,4-菲醌(densiflorolB,1)、滨蒿内酯(6,7-dimethoxycoumarin,2)、泽兰内酯(ayapin,3)、1,4,7-三羟基-5-甲氧基芴酮(dendroflorin,4)、豆甾醇(stigmasterol,5)和软脂酸1-甘油单酯(hexadecanoicacid2,3-dihydroxypropylester,6)。化合物1和5为首次从球花石斛中分得。
应用HPLC法,初步对云南36种石斛属植物中滨蒿内酯和泽兰内酯相对含量的分布式样进行检测分析;并着重对球花石斛4个居群中滨蒿内酯与泽兰内酯的含量进行了测定,其结果表明,球花石斛不同居群不同龄的假鳞茎中滨蒿内酯和泽兰内酯的含量差异很大,随年龄的增加基本呈现递减趋势。云南36种石斛属植物中只有球花石斛和密花石斛含有滨蒿内酯和泽兰内酯,文山产的美花石斛中含有少量泽兰内酯。
在对球花石斛滨蒿内酯和泽兰内酯含量与形态性状相关性研究中发现基本呈现如下规律:随叶色、茎色加深,滨蒿内酯含量升高;随茎的增粗,泽兰内酯含量减少。球花石斛13个性状的差异主要存在居群内个体间,居群间差异不明显,即以村为单位划分的居群间差异不大。
建议在球花石斛的GAP种植中应注意选择茎色和叶色较深的3龄个体,栽培中应适当加强光照。