研究背景:肥胖能够导致Ⅱ型糖尿病、癌症以及多种心血管疾病的发病风险显著上升。维持体内能量代谢平衡的胰岛素信号通路发生紊乱是导致肥胖患者发生代谢综合症的重要因素。目前,肥胖的发生发展机制仍未被完全揭示,需要进行更深入的研究。方法:本研究对Leptin缺失的ob/ob肥胖小鼠的脂肪与肝脏组织进行荧光定量PCR筛查。通过使用高浓度胰岛素处理构建模拟肥胖患者高胰岛素血症的体外细胞模型,研究肥胖导致ZFYVE28异常表达的原因。之后,基于HepG2细胞对胰岛素调控ZFYVE28表达的机制进行深入研究,并对ZFYVE28的功能进行了探索。在确定了 ZFYVE28受到胰岛素信号的间接调控,并且可以促进活化后的胰岛素受体的降解之后,我们通过GEPIA分析了ZFYVE28与多种受体酪氨酸激酶(RTKs)的表达相关性。通过多个公开的癌症表达谱数据库对ZFYVE28与肿瘤预后及肿瘤增殖之间的相关性进行了分析。通过Oncomine数据库和TIMER数据库分析了ZFYVE28在各种类型肿瘤中的表达情况。然后使用PrognoScan数据库,Kaplan-Meier Plotter数据库和GEPIA评估了ZFYVE28表达水平的变化对肿瘤临床预后的影响。接着使用TIMER数据库研究了ZFYVE28的表达水平是否能够改变肿瘤内部免疫细胞浸润情况。最后,构建荷瘤小鼠模型的实验对ZFYVE28参与肿瘤增殖的假说进行了验证。结果:肥胖小鼠的脂肪和肝脏中ZFYVE28mRNA含量显著升高。基于细胞模型的实验结果表明,胰岛素信号能够下调ZFYVE28表达。通过诱发胰岛素抵抗来阻断胰岛素信号通路的激活后,胰岛素信号抑制ZFYVE28表达的效果受到限制。之后的实验发现添加RAS信号的抑制剂能够上调ZFYVE28的表达,而使用相似的方法切断AKT信号则不能产生相同的效应。胰岛素信号通过促进NOTCH的胞内活化片段(NICD)降解,抑制了 NOTCH介导的ZFYVE28转录起始。此外,ZFYVE28能够促进活化后胰岛素受体的降解,参与胰岛素抵抗形成。对肿瘤组织进行基因表达相关性分析发现,ZFYVE28的表达水平与多种RTKs的表达显著相关,这些RTKs参与调节细胞增殖等众多生物学过程。通过分析Oncomine数据库和TIMER数据库我们发现肿瘤组织中的ZFYVE28表达水平显著低于癌旁组织。对Kaplan-Meier Plotter数据库中Pan-Cancer队列的RNA测序数据分析显示,ZFYVE28的高表达水平与更好的总生存期(OS)相关(HR=0.7,P=0.024)。结合对TCGA数据库和PrognoScan数据库的分析,我们认为ZFYVE28与多种肿瘤的临床预后显著相关。最后,动物实验的结果证实ZFYVE28能够抑制体内的肿瘤增殖。结论:我们的研究确定了 ZFYVE28受到胰岛素信号反馈调节,并且可以促进活化后的胰岛素受体的降解,表明ZFYVE28参与了胰岛素抵抗的形成过程。同时,ZFYVE28促进受体降解的功能可能影响多种RTKs,但有待后续机制实验的验证。ZFYVE28与肿瘤患者的临床预后密切相关,并能够影响体内的肿瘤增殖。总之,本研究对ZFYVE28参与肥胖发生发展的机制进行了深入的研究,结果表明ZFYVE28参与了胰岛素抵抗的形成并且是导致肥胖患者肿瘤发病率增高的关键因素。脑动静脉畸形是引起青年人颅内出血的重要风险因素之一。目前脑动静脉畸形治疗均存在相当大风险。目前仍没有安全的方法来防止其破裂出血。散发性脑动静脉畸形主要由KRAS/BRAF功能获得性突变引起。这些突变导致内皮细胞PDGFB表达下调,导致对平滑肌细胞的招募不全。在本研究中,我们证实了 THA能够抑制从散发性脑动静脉畸形患者病灶部位分离的原代内皮细胞的迁移活性并促进其对平滑肌细胞的招募。使用THA处理,内皮细胞PDGFB表达显著上调,招募平滑肌细胞的能力显著提升。深入的机制研究发现,THA对内皮细胞的影响还体现在MYC表达下调以及FN表达增加。这些改变能够从不同的方面增加患者的血管稳定性。这些结果为THA临床应用于治疗散发性脑动静脉畸形提供了理论依据,对于推动开发动静脉畸形靶向治疗药物具有重大意义。