在兔中性粒细胞中存在大量低分子量的阳离子抗菌肽，这些抗菌肽来自同一个基因家族，属于α防御素。其中NP-1由33个氨基酸组成，含有3个分子内二硫键，对G+、G-，真菌及带衣壳病毒都有抑菌活性，还能抑制HIV病毒的复制，是α防御素家族中抗菌谱最广、抗菌活性最强的一种防御素。 本论文主要研究了NP-1基因在原核及真核表达系统中的基本表达策略及抑菌机理。在大肠杆菌表达系统中，运用pET-32(a)+载体在BL21(DE3)溶原菌中进行NP-1的融合表达，融合蛋白表达量达到90.93 mg/L，其中99％为可溶性蛋白。融合蛋白经肠激酶酶切后，得到有抑菌活性的重组NP-1。实验表明，Trx融合标签蛋白对提高NP-1融合蛋白的表达量及其可溶性，保持NP-1的生物活性有极其重要的作用。同时，本文也探讨了抗生素浓度、诱导时间、IPTG浓度及培养基对NP-1基因表达量的影响，结果表明，在Amp浓度为25μg/mL、IPTG浓度为0.1mmol/L、使用LB培养基诱导培养3h，NP-1基因融合蛋白的表达量最高。 在毕氏酵母表达系统中，本研究应用pPICZα-A载体进行NP-1基因及其多串联基因的分泌表达，其表达量分别为 3.39μg/mL(pNP-1)、6.39μg/mL[pNP-1(2×)]、13.05μg/mL[pNP-1(3×)]，多价串联体的重组蛋白经溴化氰切割，得到有抑菌活性的产物。抑菌实验显示，重组NP-1对G+(苏云金杆菌，金黄葡萄球菌，枯草杆菌)及G-(大肠杆菌K12D31)都有抑菌活性，其MIC分别为10.63μg/mL、8.59μg/mL、8.13μ/mL及8.46μg/mL。重组NP-1对真菌没有明显的抑菌活性。 对NP-1的抑菌机理进行了研究，发现细胞壁合成抑制剂和DNA合成抑制剂的处理菌对NP-1敏感性增大，而多种蛋白质合成抑制剂和RNA合成抑制剂的处理菌对NP-1的敏感性下降。这种现象提示NP-1的抑菌过程不仅涉及肽与细菌细胞膜的作用，更有可能参与了对细菌蛋白质合成及核酸合成的抑制。NP-1可能先与靶细胞膜相互作用，增加膜的通透性，之后进入细菌细胞内部，与DNA结合，使之片段化，同时与核糖体RNA或蛋白质合成相关的酶作用，从而抑制蛋白质合成，达到抑制细菌生长的目的。