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目的:
制备肝素化脱细胞羊皮敷料,观察其对动物深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响,初步探讨肝素化脱细胞羊皮敷料影响烧伤创面愈合的机制,为其临床应用提供理论依据。
方法:
①绵羊处死后,去毛、取皮,用0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(TritonX-100)制备异种(羊)脱细胞真皮基质,并用低分子肝钠素注射液浸泡处理,合成肝素化脱细胞羊皮敷料。常规病理和电镜检查肝素化脱细胞羊皮敷料的组织形态及超微结构,测定吸附量,进行细菌、真菌培养。
②96只Wistar大鼠随机分为A、B、C、D组,制作大鼠背部4%深Ⅱ度烫伤模型,伤后A组用肝素化脱细胞羊皮敷料覆盖创面,B组用脱细胞羊皮敷料覆盖创面,C组用肝素钠乳膏涂沫创面,D组为对照组。测算3、7、14、21d创面愈合率,于7d、14d创面取材,光镜观察创面组织学变化,于14d电镜观察成纤维细胞结构。观察各组创面、粪、尿有无出血现象。
③120只Hartley豚鼠随机分为A、B、c、D组,制作豚鼠背部4%深Ⅱ度烫伤模型,伤后A组用肝素化脱细胞羊皮敷料覆盖创面,B组用脱细胞羊皮敷料覆盖创面,C组用肝素钠乳膏涂沫创面,D组为对照组。各组分别于0、6、12、24、48、72h行颈动脉印度墨汁灌注,光镜观察各时相段创面墨汁充盈灌注情况。
结果:
①制备出的肝素化脱细胞羊皮敷料质感柔软有弹性,不易断裂。含有低分子肝素钠4047.50±497.49IU/g。光镜检查、电镜检查均未发现表皮和真皮细胞残留,胶原结构基本完整。细菌和真菌培养呈阴性。
②伤后14、21天,A组创面愈合率优于B、C、D组(P<0.05)。伤后14天光镜观察,A组与B、C、D组比较表皮组织、肉芽组织、胶原纤维明显增多。伤后14天电镜观察,A组与B、C、D组比较成纤维细胞细胞器更丰富。各组动物创面、粪便及尿液均无出血现象。
③伤后0、6、12h各组创面印度墨汁充盈度组间比较差异无统计学意义(P>0.05),伤后24、48、72h,A组与B、C、D组印度墨汁充盈度比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:
①肝素化脱细胞羊皮敷料的制备具有可行性。
②肝素化脱细胞羊皮敷料能够促进大鼠深Ⅱ度创面愈合。
③肝素化脱细胞羊皮敷料能够改善豚鼠深Ⅱ度创面淤滞带微循环。
④肝素化脱细胞羊皮敷料安全、价廉、来源丰富,适合作为生物敷料使用。