【摘 要】
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以流式细胞仪分离雄性小麂(Muntiacusreevesi)Y染色体和雄性黑麂(Muntiacuscrinifrons)Y,YX+4(即黑麂的X染色体,由X和4号染色体融合而来)和1号染色体,并且利用DOP-PCR(Degene
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以流式细胞仪分离雄性小麂(Muntiacusreevesi)Y染色体和雄性黑麂(Muntiacuscrinifrons)Y<,1>,Y<,2>X+4(即黑麂的X染色体,由X和4号染色体融合而来)和1号染色体,并且利用DOP-PCR(Degenerateolignuclectideprimer-PCR)技术富集了分离的各单条染色体DNA.以雄性黑麂的Y<,1>,Y<,2>X+4和1号染色体的DOP-PCR产物为模板,用根据人的SRY(sexdeterminingregionoftheYchromosome)基因保守区内设计的一对引物对其进行扩增,结果显示雄性黑麂只有Y<,2>染色体出现了Sry扩增片段,表明黑麂的Sry基因很可能位于黑麂的Y<,2>染色体上.然后对扩增产物进行克隆和测序,比较它与人SRY基因的同源性,测序结果证实其与人的SRY基因的同源性为83﹪,证实了这段扩增片段确实为黑麂的Sry基因片段.最后从雄性黑麂成纤维细胞中提取基因组DNA,并用上述同一对引物对其进行扩增,亦得到一条扩增的片段,对此扩增片段进行克隆,测序.
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