论文部分内容阅读
目的:杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)以皮入药,因其中含有大量杜仲胶,属硬质橡胶,煎煮时影响有效成分的溶出,故临床上多炮制至“断丝”后应用,以提高有效成分的溶出率。尽管现行版《中国药典》规定了其炮制方法,但缺乏量化工艺参数和客观质量控制标准。因此,本论文从炮制(盐炙法)工艺对杜仲化学成分的影响入手,结合杜仲炮制前后化学成分的变化分析和分离,确定因炮制工艺引起质变和量变的杜仲化学成分。依据炮制工艺对有效成分的影响,筛选优化炮制工艺参数,制定杜仲盐炙的合理炮制工艺,建立炮制品的质量控制标准,为临床用药的有效性和安全性提供保障。材料与方法:材料:杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮,购自草药店。方法:1.采用UV光谱法、TLC法、HPLC法,分析杜仲生品和炮制品化学成分的差异,研究炮制工艺对杜仲化学成分的影响。2.采用硅胶、凝胶、高效液相等色谱技术,分离杜仲高温炮制后变化显著的化学成分。利用理化性质和核磁共振氢谱、核磁共振碳谱、质谱数据鉴定分离得到的化合物结构。3.采用TLC法和HPLC指纹图谱法鉴定杜仲中受炮制工艺显著影响的化学成分。4.依据“断丝”且不损失有效成分的原则,优化杜仲的炮制工艺参数,制定杜仲的炮制工艺,建立炮制品质量标准。结果:1.炮制工艺对杜仲化学成分的影响结果表明,当温度达到140℃以上,杜仲即可“断丝”,而且当温度超过140℃时,生品和炮制品的化学成分差异显著。2.共计分离得到16个化合物,其中从生杜仲中分离得到11个化合物,栀二醇为首次从杜仲中分离得到。从盐杜仲中分离得到5个化合物。3.高温炮制后杜仲的多数成分含量明显降低。环烯醚萜类活性成分京尼平、栀二醇、杜仲醇、京尼平苷酸显著减少,木脂素类松脂醇二葡萄糖苷、丁香脂素二葡萄糖苷、中脂素二葡萄糖苷的含量也大量损失。高温炮制后的增量成分松脂素、表松脂素、中脂素是炮制后显著减少的双环氧木脂素苷类化合物的苷元。4.依据“断丝”且不损失有效成分的原则,确定杜仲的盐炙工艺为:取杜仲丝或块,2%盐水润透,60℃烘干,再于140℃烘制60分钟。根据此工艺,制订了盐杜仲的质量控制标准。结论:1.本论文首次采用光谱.色谱联用的方法,考察炮制工艺参数对杜仲化学成分的影响,从宏观和微观上明确了杜仲炮制前后化学成分的变化。2.首次确定杜仲经高温炮制后变化显著的多个化学成分。以多种活性成分为对照品,建立杜仲药材的HPLC指纹图谱。研究结果表明,炮制温度对杜仲化学成分影响明显,尤其是杜仲中的环烯醚萜类和木脂素类活性成分在高温炮制后含量明显减少,为杜仲的盐炙工艺和盐炙品的质量控制研究提供科学依据。3.通过生品和炮制品的对比分析,本论文首次提出“断丝且不损失有效成分”的杜仲盐炙的炮制原则,并依据该原则确定杜仲的炮制工艺,制订炮制品的质量控制标准。4.本论文对杜仲盐炙工艺研究结果与古文献记载的杜仲应采用“文火”、“中火”炒至“断丝”的论述相吻合。