目的:探讨粒/巨细胞集落刺激因子（GM-CSF）分泌细胞联合异体肿瘤细胞疫苗治疗晚期实体瘤患者的安全可行性和有效性以及对机体免疫状况的影响。方法:患者:选择我院2007年1月至2008年5月病理诊断明确的Ⅳ期癌症患者共60例,其中男性38例,女性22例,中位年龄47岁（25岁-84岁）,Kps评分:60-80。其中包括,恶性黑色素瘤患者11例,卵巢癌患者10例,肾癌患者15例,胃癌/结直肠癌患者14例,乳腺癌患者10例。接受肿瘤疫苗治疗前一个月未接受放疗和/或化疗,在患者及家属知情同意的情况下进行治疗,并签署知情同意书。根据患者的病理类型在接受治疗前培养相应肿瘤细胞系使肿瘤细胞数量>6×10⁷,以满足治疗需要,经灭活剂灭活使肿瘤细胞停止分裂增值,液氮保存。以GM-CSF平稳表达的A549细胞为分泌细胞（由北京博沃德生物技术有限公司提供）,GM-CSF的分泌量大于1ug/10⁶细胞/24小时。每次注射前复苏异体肿瘤细胞,并进行无菌检测确保细胞未被污染。将这两种细胞混合后即刻进行注射,每次皮下注射异体肿瘤细胞和GM-CSF分泌细胞混合物1ml,1次/周,共6次。注射部位为取双上臂内测中上1/3处,双大腿内侧中上1/3处,轮流注射。在第1,5次注射同时,在前臂前1/3处内侧皮肤进行异体肿瘤细胞DTH接种。每次注射都要按照《生物治疗观察表》要求项目详细记录DTH反应情况、注射部位及全身反应情况。在第一次治疗前和最后一次治疗后取外周血样10ml应用流式细胞仪检测:CD4+Th细胞、CD8+CTL细胞、CD4+CD25+CD127-（Treg）细胞、CD3-CD16+56+CD45+（NK）细胞比例变化情况。应用ELISA检测血清细胞因子IFN-γ,IL-4,TGF-β₁变化情况。完成治疗1个月后进行影像学检查,进行疗效评价。结果安全性:所有患者均完成治疗,无因不良反应而停止治疗的患者。治疗后KPS评分无明显变化（P>0.05）。治疗过程中7/60例患者出现发热,都在39度以下,1例出现头痛头晕,未治疗自行好转。48/60例患者出现红肿疼痛硬结,40/60例瘙痒,2/60例出现水泡。未发现疫苗相关的自身免疫反应,未发现其他治疗结束一个月后评价,无完全缓解（CR）和部分缓解病例（PR）,1例死亡,4例至少有一处肿瘤缩小但未达到部分缓解（MR）;16例进展,胃/结直肠癌10例,恶性黑色素瘤、乳腺癌各2例,卵巢癌、肾癌各1例:其中包括原有肝转移10例,脑转移2例,肺转移1例患者,其他部位转移3例;40例稳定,肾癌12例,恶性黑色素瘤、卵巢癌各9例,乳腺癌8例,胃/结直肠癌2例。随访至2008年6月30日因疾病进展（PD）死亡8例,其中6例肝转移,1例脑转移。治疗后有5例病情稳定（SD）超过9周。4例生存超过1年,其中恶性黑色素瘤2例,胃/结直肠癌2例。中位总生存时间5.5个月。因为完整的肿瘤细胞是多价免疫原性,采用国际通用的评价标准以DTH接种部位的红肿硬结最大直径作为评价标准。第1次接种12/60例DTH阳性,第5次接种44/60例DTH阳性,其中MR患者2例,16例进展患者中有3例DTH阳性;40例稳定患者中有34例DTH阳性。稳定和进展患者的局部反应程度和DTH反应程度都有明显差异（Z=4.243 P=0.000,Z=3.499 P=0.000）。试验还观察到稳定和进展患者的DTH阳性率有明显差异（P<0.005）,且DTH反应程度也有明显差异（P<0.001）,试验表明稳定患者的DTH反应程度及阳性率明显强于进展患者,并且DTH反应程度和局部反应程度线性相关（R²=0.594,P<0.001）。各病种DTH阳性反应情况,恶性黑色素瘤8/11例阳性、卵巢癌7/10例阳性、肾癌12/15例阳性、乳腺癌7/10、胃结直肠癌7/14例阳性。局部反应程度和临床疗效之间也有一致性。2例局部反应4级的胃/结直肠癌患者,病情有所好转。治疗后TGF-β₁在恶性黑色素瘤和肾癌明显降低（P<0.05）。CD8+T细胞在治疗后的恶性黑色素瘤、卵巢癌、肾癌明显升高（P<0.05）。Treg细胞在治疗后的所有患者都明显降低（P<0.05）。治疗前后IFN-γ的变化没有统计学差异,但治疗后有升高的趋势（P=0.064）。结论:GM-CSF联合异体肿瘤细胞疫苗治疗晚期肿瘤患者是安全可行的,耐受良好,能改善患者的机体免疫状态。局部反应程度和临床疗效之间也有一致性。