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采用含01% Triton X-100的PBS缓冲液(0.1mol/L, pH7.4)分别从海参肠及体壁中提取获得AChE粗酶,结果表明,海参肠与体壁AChE粗酶具有相似的酶学性质,其最适反应pH值为8.0,pH在6-9时稳定；最适反应温度为35℃左右,在25-40℃内热稳定性较好。海参AChE粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱(AcSChI),但对碘化硫代丁酰胆碱(BuSChI)的作用较弱。当AcSChI浓度大于50 mmol/L时,产生明显的底物过量抑制效应。Sn2+、Zn2+、Hg2+、Ag+、Cr6+、Cu2+及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁AChE粗酶有不同程度的抑制作用。采用紫外照射30 min后室温静置的方法诱导海参肠自溶,对其自溶前后AChE的酶活变化进行研究,发现自溶前后AChE酶活无显著变化。在紫外照射30 min,室温静置4h条件下,通过考察AChE抑制剂毒扁豆碱对海参肠自溶过程中TCA可溶性蛋白溶出速率的影响,发现毒扁豆碱可显著促进海参肠的自溶程度,表明AChE对海参肠自溶可能具有一定的抑制作用。从海参肠中提取的AChE粗酶液经DEAE-52阴离子交换层析、Sepharose CL-6B凝胶层析,纯化倍数达35.49倍,S DS-PAGE测定显示一条带,分子量约为68 kDa。测得该酶的最适反应pH值为7.5,pH在6-8时稳定；最适反应温度为35℃左右,25～40℃内热稳定性较好。其特异性底物为AcSChI,水解该底物的Km值为0.62 mmol/L。当AcSChI浓度大于0.8mmol/L时产生明显的底物过量抑制效应。毒扁豆碱和BW284c51对纯化后的酶有明显的抑制作用,iso-OMPA对酶的抑制作用较弱。以3-羧基苯基-乙基二甲基铵为配基,与溴化氰活化琼脂糖凝胶交联制备亲和层析柱,分离海参肠中AChE,对其洗脱条件进行优化。结果显示,其适宜的平衡体系为含0.3mol/L NaCl的PBS (0.05 mol/L, pH7.4)缓冲液,适宜洗脱体系为含0.2mol/L四乙基碘化铵的P BS(0.05 mol/L, pH7.4)缓冲液。此条件下,海参肠AChE可得到较好的吸附和分离。初步纯化后的AChE经Native-PAGE电泳分离出三条具有酶活性的条带,说明AChE在海参肠内可能以多种形式存在,呈现多态性。