本文以棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus，HearNPV)的结构蛋白PK-1、PKIP、FP25K为研究对象，基于HaBacHZ8 bacmid系统，分别构建了缺失pk-1、pkip以及FP25K基因的部分结构域缺失的bacmid，对其进行功能研究。主要研究内容包括：　　 第一章：文献综述。以综述的形式扼要介绍了杆状病毒的应用、分类特征、复制周期，阐述了病毒丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶和杆状病毒FP25K蛋白的研究进展情况。最后介绍了本论文的研究目的和意义。　　 第二章：对HearNPV pk-1基因进行了功能分析。pk-1基因预测编码约31kDa的蛋白激酶，为了进一步分析pk-1基因的生物学功能，我们运用λ噬菌体Red重组系统构建了缺失pk-1基因的重组bacmid，转染细胞后以期获得重组病毒。HaBacpk-1-KO-ph的bacmid DNA转染的昆虫细胞只有点状的分布却未发现荧光的扩散，收集转染上清之后的感染结果则未发现有荧光细胞的出现，表明pk-1基因是HearNPV复制的必需基因。　　 第三章：对HearNPV pkip基因进行了功能分析。pkip基因预测编码约20kDa的蛋白，可以与蛋白激酶发生相互作用。为了进一步分析pkip基因的生物学功能，我们运用λ噬菌体Red重组系统构建了缺失pkip的bacmid，重组bacmid DNA转染细胞后获得重组病毒。转染和感染的实验表明pkip基因为HearNPV复制的非必需基因。　　 第四章：对FP25K的功能域进行了预测和生物学功能分析。前期本实验室的实验结果显示fp25k基因的转录产物在感染后18小时检测到，并持续到感染末期，且FP25K蛋白也于感染后18小时开始表达。fp25k基因的缺失能够导致BV的感染性有所增强。为了进一步分析该基因的结构域在调控BV/ODV生成的过程中的功能，在前期已构建的fp25k基因缺失的bacmid基础上，根据文献报道和序列比对分析，我们分别回复了三个截短不同结构域的fp25k基因片段，转染，感染和免疫荧光定位实验的结果显示预测的fp25k基因肌动蛋白结合区域对于FP25K在细胞内的分布有较大影响。　　 第五章：总结与展望。本章对本研究中所研究的三个基因的功能进行了总结。通过分子生物学方法构建重组病毒的方法，我们证明HearNPV中pk-1基因是病毒复制的必需基因，而pkip基因则不影响病毒的复制。在对fp25k基因功能域的研究中，我们的结果显示fp25k基因中肌动蛋白结合区域对于FP25K蛋白在细胞内的分布有较大影响，表明FP25K蛋白的调控BV/ODV生成的生物学功能可能与肌动蛋白结合区域有关。