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我国是核桃种植和生产的大国之一,核桃作为一种药食两用的经济作物,目前越来越受到人们的关注。研究发现核桃中单宁酸含量非常的丰富并且具有很多的生理和生物活性,其可以延缓一些慢性疾病发生的几率,并且已经广泛的应用于医药和化妆品行业。本课题以河北养元智汇饮品股份有限公司提供的核桃乳生产过程中产生的废弃物核桃渣为试验原料。经过分析核桃渣主要是核桃仁内种皮和碎核桃仁的混合物,其干物质中含有蛋白质和油脂,并且单宁酸的含量丰富,因此值得开发利用。本课题优化了核桃渣单宁酸的提取工艺;利用大孔树脂对核桃渣单宁酸进行纯化;利用HPLC对核桃渣单宁酸的单体酚组成进行了研究;研究了核桃渣单宁酸的体内外抗氧化能力和抑菌性能。为核桃产品及其副产物的综合利用提供依据,提高了经济价值。本课题首先对核桃渣的基础成分进行了研究,核桃渣单宁酸的提取采用超声波辅助法,该方法提取效率高,操作简便。在单因素的基础上,通过正交试验优化单宁酸的提取条件。最终确定核桃渣单宁酸最佳提取时间60 min,料液比1:70,提取温度70℃,超声波功率100 W,提取液pH 1.5,提取液为60%乙醇。三次提取得到单宁酸的含量为51.34 mg/g,通过定性试验分析,确定核桃渣中单宁酸为水解类单宁。本研究先后利用乙醇,氯仿等有机溶剂对核桃渣单宁酸初提液进行初步除杂,为了进一步的纯化,根据单宁酸的性质,然后选用非极性、弱极性、中等极性的HPD-450、AB-8、D-001、D-201、XDA-1、XDA-10 等 6 种不同型号的大孔吸附树脂进行研究。利用静态吸附和解析的方法筛选最适合纯化核桃渣单宁酸的大孔吸附树脂,然后利用动态吸附和解析的方法研究最适合核桃渣单宁酸纯化的条件。结果表明,XDA-1型大孔吸附树脂最合适核桃渣单宁酸的纯化,优化的吸附条件是:上样流速为3 mL/min,料液浓度为0.3 mg/mL;优化的解析条件是:解析流速是1 mL/min,解析剂为70%的乙醇,乙醇的pH 1。将洗脱液进行浓缩,干燥,得到纯度为82%的单宁酸制品。本研究利用高效液相色谱法(HPLC)对核桃渣单宁酸组成进行了分析。通过对色谱条件的摸索和优化,选用Inertsil ODS-SP C18(250×4.6 mm)色谱柱,以2%冰乙酸和乙腈作为流动相梯度洗脱分离单宁酸物质,流速为1 mL/min,检测波长为280 nm。结果显示:各物质呈现良好的线性关系,加标回收率在80.66%~108.17%,重复性,稳定性和精密度RSD均小于10%。该方法的灵敏度高,方便,准确性良好。本课题研究了核桃渣单宁酸的体内外抗氧化能力。在体内抗氧化的研究中利用D-半乳糖诱导清洁级昆明小鼠的衰老模型,测定其体内抗氧化酶的活力;体外研究了核桃渣单宁酸的还原能力,对小鼠肝匀浆自氧化的抑制作用以及对DPPH,ABTS,超氧阴离子(O2-·)等自由基的清除能力。结果表明核桃渣单宁酸具有良好的抗氧化活性,且和其浓度呈现正相关性;其中对DPPH自由基的清除能力为85%,对超氧阴离子自由基的清除能力要弱于DPPH自由基,当浓度在0.5 mg/mL时,清除能力小于60%。对ABTS自由基的清除能力最强,当单宁酸浓度在0.05 mg/mL时,对ABTS+自由基的清除率达到93%。其中对小鼠肝匀浆体外自氧化也有一定的抑制作用,当浓度为1 mg/mL时,抑制率小于20%。在体内的研究中,核桃渣单宁酸可以显著的提高衰老模型小鼠体内肝脏和肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)的活力,减少丙二醛(MDA)的含量。本课题研究了核桃渣单宁酸的抑菌能力。结果表明核桃渣单宁酸浓度在0.6 mg/mL时,对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌有很强的抑制能力,浓度在1 mg/mL时,对米曲霉和毛霉也有很强的抑制能力,但是对黑曲霉无抑制能力。