平菇（Pleurotus ostreatus）是一类重要的食用菌,其适应性强,栽培原料来源广,产量高,效益好,近年来发展迅猛,已成为城乡人民大众化的菌类蔬菜。但是,目前平菇产业发展面临着品种由于长期无性繁殖而退化明显、产量不稳、育种手段单一等实际问题,为了提高育种的效果和加速品种更新换代,本实验采用原生质体再生技术进行平菇新菌株的选育,对平菇原生质体制备及再生条件进行优化,将得到的再生菌株进行初步筛选的一系列试验,旨从细胞水平上探索一条食用菌育种新途径,为发展和完善食用菌新菌株选育提供依据。1.本试验对影响平菇原生质体制备及再生条件的几大因素综合酶种类、酶浓度、菌龄、酶解温度、酶解时间、稳渗剂及培养基等条件进行了研究,结果表明,以PDA液体综合培养基培养5d的幼嫩菌丝体,单一酶以2%浓度的溶壁酶或混合酶以1%的纤维素酶和1%的蜗牛酶,在30℃下作用3h,以0.6mol/L的MgSO₄为渗透压稳定剂是制备平菇原生质体的最佳条件;以菌龄为3d,酶解时间为1h,0.6mol/L的MgSO₄为渗透压稳定剂的PDA再生综合培养基为原生质体再生的最佳条件,再生率最高达到4.35%。2.采用优化的条件进行原生质体的制备与再生,最终再生出98个再生菌株,对再生植株菌丝体进行镜检,获得47个具有锁状联合的菌株。将再生菌株分别与出发菌株进行拮抗试验,获得39个再生菌株菌丝与其亲本有明显的拮抗线。3.通过对39个再生菌株与出发菌株的菌丝颜色、密度、生长势等方面的比较试验,得到各方面优于出发菌株的再生植株。在平板中进行菌丝长速测定发现,各菌株间长速有差异性,7、11、13、17、26、36、37高于出发菌株,生长速度与生长势有相关性。对栽培种进行长速测定发现,各菌株差异显著,而且和平板中菌丝长速相关,平板中长速快的,栽培种的长速也快。4.抗绿霉试验获得在抗杂能力优于出发菌株的再生菌株,通过抗绿霉试验,发现1、3、7、14、18、24、25、26、30、33、37、38这几个再生菌株与绿霉的拮抗线宽于出发菌株,说明其抗杂能力比出发菌株高,长势好的菌株抗杂能力也强。可作为进一步筛选的依据。