HBV感染者血清cccDNA与病毒复制及肝组织损伤的关系

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目的:探讨HBV感染者血清cccDNA与其体内HBV复制及肝组织学变化状态的关系,初步阐明血清cccDNA检测的临床应用价值。方法:血清标本采自包括35例确诊的非HBV感染患者与663例HBV感染相关肝病患者包括非活动性HBsAg携带者(asymptomaticcarrier,ASC)、慢性HBV携带者、急性肝炎(acute hepatitis B,AHB)、慢性肝炎(chronic hepatitis B,CHB)、肝硬化(HBV related livercirrhosis,HBV-LC)和肝细胞癌(HBV related hepatocellular carcinoma,HBV-HCC)各为35、70、41、392、65、60例。在HBV基因组DNA缺口的上下游设计一对引物,并在负链开口的下游设计一条荧光分子信标探针,以分子信标PCR方法检测cccDNA;血清HBVDNA定量、乙肝三系与肝功能均用常规方法检测。50例血清ALT<2NUL,HBVDNA阳性患者行肝组织活检与血清cccDNA检测。结果:①446例HBeAg阳性血清cccDNA阳性144例,217例HBeAg阴性血清cccDNA阳性12例,阳性率有显著性差异(144/446,32.2%Vs12/217,5.5%,X~2=58.08,P<0.01);511例HBV-DNA阳性血清中,cccDNA阳性156例,而152例HBV-DNA阴性血清者cccDNA均阴性(X~2=60.68,P<0.01)。②663例血清HBsAg阳性标本中,507例cccDNA阴性血清转氨酶正常者95例,156例cccDNA阳性血清转氨酶正常者15例,存在显著性差异(X~2=7.17,P<0.05);而cccDNA阴性标本与阳性标本的血清胆红素异常率无显著差异(35/156Vs109/507,X~2=0.52,P>0.05)。511例血清HBVDNA阳性患者中,血清ALT<80U/L者181例(包括79例肝功能血清指标正常(HBV携带者),ALT>80U/L者330例(mAST<2ULN者141例,mAST>2ULN者189例),ALT近正常患者血清cccDNA阳性率低于血清酶偏高患者(21/181Vs135/330,X~2=47.34,P<0.01)但与mAST无关(61/80Vs74/115,X~2=0.56,P>0.05).16例“HBV携带者”进行了肝穿刺活检(包括所有6例cccDNA阳性患者中1例为G1,3例为G2,2例G3),另有34例ALT<80U/L者进行了肝穿刺活检,血清cccDNA与炎症活动相关(X~2=35.38,P<0.01)。③同期观察HBV携带者48例,随访1月血清cccDNA阳性18例均出现ALT波动,血清cccDNA阴性者出现ALT波动2例(X~2=40.2,P<0.01)。结论:血清cccDNA可能是患者体内HBV复制及肝组织损伤的标志物之一。
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