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目的：通过生物信息技术预测分析布鲁氏菌Omp31蛋白的T-B联合后备优势抗原表位，用人工合成肽段免疫小鼠，分析其抗原性和免疫应答的特点，为布鲁氏菌表位疫苗的研制奠定基础。 方法：1）利用DNAStar软件、IEDB软件综合分析预测Omp31蛋白的B细胞优势表位，利用SYFPEITHI和ProPred MHC Class-ⅡBinding Peptide Prediction Server软件分析预测Omp31蛋白的T细胞表位，筛选出分值较高的T-B细胞联合抗原表位；2）用Omp31T-B联合抗原表位合成肽段免疫BALB/c小鼠4次后，采用ELISA检测小鼠血清中特异性IgG1、IgG2a抗体水平以及细胞因子IL-2、IL-4、IL-10水平；3）ELISPOT检测脾淋巴细胞中IFN-γ阳性的T淋巴细胞活化情况。 结果：1）Omp31蛋白具有多处抗原指数较高的区段，通过生物信息软件综合分析筛选出了4个潜在的T-B细胞联合抗原表位区段，分别为4～11，108～114，152～157，171～176区段；2）用Omp31T-B细胞联合抗原表位合成肽段免疫BALB/c小鼠4次后，小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体水平较对照组显著增高，IL-2、IL-4、IL-10水平均较对照组显著增高，且免疫组中IL-2与IL-4、IL-10升高水平对比具有差异性；3）免疫组小鼠脾淋巴细胞中分泌IFN-γ的T淋巴细胞数较对照组显著增高。 结论：本研究中筛选的4个Omp31T-B联合表位抗原合成的肽段能刺激小鼠产生特异性的细胞免疫应答和体液免疫应答，表明这些抗原表位具有良好的免疫原性，为布鲁氏菌多价表位疫苗的构建提供参考。