金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌血流感染炎症标志物变化规律的实验研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Cskn__ZHANG
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目的:1.探讨C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)和白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)在大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌血流感染(Bloodstream Infection,BSI)患者中的变化规律2.运用金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus) ATCC25923和大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli) ATCC25922建立ICR小鼠的BSI模型,以探讨CRP、PCT、IL-6、IL-1β和巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophageinflammatory protein-1α,MIP-1α)在大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923所致血流感染小鼠中的变化规律。  方法:1.选取2012年1月至2013年1月解放军总医院临床连续两次血培养结果阳性的细菌性血流感染患者223例,其中革兰阳性菌所致血流感染患者共102例,革兰阴性菌所致血流感染患者共121例,大肠埃希菌组67例,金黄色葡萄球菌组25例,收集同期体检的非血流感染者38例作为健康对照组。严格规定各组的入选标准,保证细菌血流感染组所受病理影响仅限于细菌血流感染,每组除相应影响因素外,不受或尽量少受其他病理因素影响。在采集血培养标本的同一时间收集用于检测炎症指标的血液标本。用西门子的BN-Ⅱ特种蛋白分析仪测定CRP,用mini VIDAS免疫分析仪检测PCT,用罗氏的Cobas E411测定IL-6,用Sysmex XS-2100全自动血液分析仪测定所收集病例的白细胞计数(white bloodcell count,WBC)及分类,每台仪器均使用与其配套的试剂,并在采血后4h内完成各项检测。用ROC曲线下面积分析和比较CRP、PCT和IL-6诊断大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌血流感染的作用  2.运用大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923建立ICR小鼠的血流感染模型,收集小鼠的血液标本。用MINDRAY BC-3000Vet血细胞分析仪检测小鼠血液WBC,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法定量测定小鼠血清中的CRP、PCT含量,应用悬液芯片技术检测小鼠血清中的细胞因子IL-6、IL-1β和MIP-1α。用ROC曲线下面积分析CRP、PCT、IL-6、IL-1β和MIP-1α鉴别小鼠大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染的作用。  结果:1.血流感染患者的WBC、中性粒细胞百分比、CRP、PCT和IL-6均较对照组明显升高(P<0.05),血流感染者的淋巴细胞百分比较对照组明显减低(P<0.05)。  2.CRP和PCT在革兰阴性菌血流感染组与革兰阳性菌血流感染组之间无统计学差异(P>0.05),IL-6在革兰阴性菌感染组的浓度明显高于革兰阳性菌血流感染组(P<0.05); CRP和PCT在大肠埃希菌血流感染组与金黄色葡萄球菌血流感染组之间无统计学差异(P>0.05),IL-6在大肠埃希菌感染组的浓度明显高于金黄色葡萄球菌血流感染组(P<0.05)。  3.CRP和PCT的ROC曲线下面积在革兰阴性菌血流感染组与革兰阳性菌血流感染组之间无统计学差异(P>0.05),在大肠埃希菌血流感染组与金黄色葡萄球菌血流感染组之间亦无统计学差异(P>0.05);IL-6的ROC曲线下面积在革兰阴性菌感染组明显高于革兰阳性菌血流感染组(P<0.05),在大肠埃希菌感染组明显高于金黄色葡萄球菌血流感染组(P<0.05)。  4.小鼠血液中的WBC在大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染时,均在感染12h后明显升高(P<0.05);小鼠血液中的CRP在大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染3h后明显升高(P<0.05); PCT在小鼠感染大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923后1h即明显升高(P<0.05);IL-6、IL-1β和MIP-1均在小鼠感染大肠埃希菌ATCC25922后1h即明显升高(P<0.05),且三者的升高水平分别高于相应的金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染组(P<0.05)。  5.ROC曲线下面积的分析结果显示,WBC、CRP和PCT的曲线下面积在大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染之间无明显差异(P>0.05),小鼠血液中的IL-6、IL-1β和MIP-1α在大肠埃希菌ATCC25922血流感染时的升高水平明显高于金黄色葡萄球菌ATCC25923血流感染。  结论:1.CRP、PCT和IL-6在血流感染时均明显升高,有利于辅助临床诊断,且IL-6浓度在革兰阴性菌组明显高于革兰阳性菌组,在大肠埃希菌组亦明显高于金黄色葡萄球菌组。2.小鼠患血流感染时,其血液中CRP、PCT、IL-1β、IL-6和MIP-1α水平的升高时间较WBC早7-9h。3.WBC、CRP、PCT在大肠埃希菌ATCC25922感染和金黄色葡萄球菌ATCC25923感染之间无明显差异; IL-1β、IL-6和MIP-1α在大肠埃希菌ATCC25922感染时的升高水平明显高于金黄色葡萄球菌ATCC25923感染。
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