论文部分内容阅读
目的:探讨骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stemcells, BMSCs)移植联合减重步行训练对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复的影响。方法:选取Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,采用改良的简易打击装置制作T11完全性SCI模型,最终将造模成功的40只SCI大鼠根据干预方法的不同按随机数字表法分为干细胞移植组、减重步行训练组、联合治疗组(干细胞移植联合减重步行训练)和对照组(不做任何干预处理),每组10只大鼠。脊髓损伤手术1周后,对干细胞移植组及联合治疗组大鼠进行干细胞移植。取传至第3代的BMSCs,移植前一天用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Edu)标记,移植后减重步行训练组及联合治疗组进行减重步行训练,其余2组进行自由活动。SCI后第1、2、3、4和5周通过(Basso-Beattie-Bresnahan, BBB)运动功能评分来判断运动功能恢复情况,SCI第5周,应用免疫组化染色及免疫荧光染色的方法检测神经特异性标志物:神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白(MAP-1β)、波形蛋白(VIM)阳性表达,观察移植细胞的存活、分化及损伤部位神经纤维的恢复情况。结果:BBB运动功能评分显示,SCI手术第2周联合治疗组BBB评分为(6.60±0.97)分,明显高于其余3组,干细胞移植组和减重步行训练组BBB评分分别为(5.00±0.67)分、(4.80±0.63)分,均高于对照组,但两组之间BBB运动功能评分差异无统计学意义(P>0.05)。术后第3周,干细胞移植组的BBB评分为(8.00±0.670)分,高于减重步行训练组BBB评分为(6.80±0.79)分,(P<0.05)差异具有统计学意义。免疫组化染色法显示,有不同程度的神经特异性标志物(NSE、MAP-1β、VIM)阳性细胞充填于各组大鼠的SCI组织中,通过半定量分析法读取各组大鼠脊髓组织中阳性表达半定量值,联合治疗组分别为(4.72±0.19)分、(4.50±0.22)分、(4.62±0.27)分,明显高于其余3组(P<0.05),组间差异具有统计学意义。免疫荧光染色法显示,联合治疗组神经特异性标志物(NSE、MAP-1β、VIM)荧光表达明显强于其余3组,同时可见明显的神经纤维增生、分化。结论:干细胞移植结合减重步行训练可有效促进SCI大鼠神经功能的恢复,效果明显优于单纯干细胞移植组和减重步行训练组。