减重步行训练对脊髓损伤鼠干细胞移植后神经细胞诱导分化的实验研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tmd632
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目的:探讨骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stemcells, BMSCs)移植联合减重步行训练对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复的影响。方法:选取Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠,采用改良的简易打击装置制作T11完全性SCI模型,最终将造模成功的40只SCI大鼠根据干预方法的不同按随机数字表法分为干细胞移植组、减重步行训练组、联合治疗组(干细胞移植联合减重步行训练)和对照组(不做任何干预处理),每组10只大鼠。脊髓损伤手术1周后,对干细胞移植组及联合治疗组大鼠进行干细胞移植。取传至第3代的BMSCs,移植前一天用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Edu)标记,移植后减重步行训练组及联合治疗组进行减重步行训练,其余2组进行自由活动。SCI后第1、2、3、4和5周通过(Basso-Beattie-Bresnahan, BBB)运动功能评分来判断运动功能恢复情况,SCI第5周,应用免疫组化染色及免疫荧光染色的方法检测神经特异性标志物:神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白(MAP-1β)、波形蛋白(VIM)阳性表达,观察移植细胞的存活、分化及损伤部位神经纤维的恢复情况。结果:BBB运动功能评分显示,SCI手术第2周联合治疗组BBB评分为(6.60±0.97)分,明显高于其余3组,干细胞移植组和减重步行训练组BBB评分分别为(5.00±0.67)分、(4.80±0.63)分,均高于对照组,但两组之间BBB运动功能评分差异无统计学意义(P>0.05)。术后第3周,干细胞移植组的BBB评分为(8.00±0.670)分,高于减重步行训练组BBB评分为(6.80±0.79)分,(P<0.05)差异具有统计学意义。免疫组化染色法显示,有不同程度的神经特异性标志物(NSE、MAP-1β、VIM)阳性细胞充填于各组大鼠的SCI组织中,通过半定量分析法读取各组大鼠脊髓组织中阳性表达半定量值,联合治疗组分别为(4.72±0.19)分、(4.50±0.22)分、(4.62±0.27)分,明显高于其余3组(P<0.05),组间差异具有统计学意义。免疫荧光染色法显示,联合治疗组神经特异性标志物(NSE、MAP-1β、VIM)荧光表达明显强于其余3组,同时可见明显的神经纤维增生、分化。结论:干细胞移植结合减重步行训练可有效促进SCI大鼠神经功能的恢复,效果明显优于单纯干细胞移植组和减重步行训练组。
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