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目的:研究早期-延迟相联合肢体远隔缺血预处理对大鼠肝缺血/再灌注损伤的作用及对Bcl-2、Bax的影响。方法:将体重为230~250g的40只健康的雄性SD大鼠随机地分为5组(n=8/组):假手术组(S组):在大鼠开腹前24h行第一次麻醉,且不进行其他处理,在大鼠开腹前行第二次麻醉,分离肝蒂,不做其余处理;缺血/再灌注组(I/R组):在开腹前对大鼠的处理与S组相同,在开腹后用无损微血管夹阻断血流进入肝左中叶,30min后松开微血管夹再灌注3h;早期相肢体远隔缺血预处理组(ELRIPC组):在大鼠第二次麻醉前对大鼠的处理与S组相同,在第二次麻醉后采用捆绑法行肢体缺血预处理随后使用I/R组的方法构建肝脏I/R的模型;延迟相肢体远隔缺血预处理组(DLRIPC组):在第一次麻醉之后对大鼠进行肢体远隔缺血预处理,第二次麻醉之后使用与I/R组一致的方法构建肝脏I/R的模型;早期-延迟相联合肢体远隔缺血预处理组(EDLRIPC组):第一次麻醉后对大鼠进行肢体远隔缺血预处理,第二次麻醉后的处理方法与ELRIPC组第二次麻醉后处理方法相同。各处理组大鼠在肝脏缺血30min再灌注3h后、S组在相同的时间段,取下腔静脉血2ml,肝左中叶的部分切除后作为指标进行实验检测:生化分析仪测定相关酶系的活性;对肝脏切片进行HE染色,光镜下对肝脏组织显微结构的变化进行观察;采用免疫组化法检测肝脏组织Bcl-2及Bax蛋白的表达的阳性率(BI);TUNEL法检测肝细胞凋亡指数(AI)。结果:1、血清中ALT和AST的水平:与S组相比,I/R组、ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组ALT和AST的活性水平均有所提升,且差异有统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组ALT和AST的活性水平均降低,且差异有统计学意义(P<0.05);ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组三组间ALT和AST的水平相似,尚不能认为差异有统计学意义。2、光镜下肝脏组织的显微结构:S组中肝索结构完整,肝细胞的形态结构大致处于正常范围,个别的肝血窦存在轻微充血;I/R组中肝组织的结构异常紊乱,一少部分的细胞水肿饱胀并且表现出空泡状变性甚至出现气球样变,肝血窦受到明显的挤压且存在炎性细胞零星地分散;ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组中肝脏组织受到的损伤与I/R组相比较有显著的好转,而三组间的受损情况相仿。3、各组中Bcl-2及Bax蛋白的表达阳性率(BI):与I/R组相比,ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组中Bcl-2的BI值增高,且差异有统计学意义(P<0.05),三组之间任意二组进行比较尚不能认为差异有统计学意义;与I/R组相比,ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组各组中Bax的BI值明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05),三组之间任意二组进行比较尚不能认为差异有统计学意义。4、各组中肝细胞的凋亡指数(AI):与S组相比,I/R组、ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组的AI值均上升,且差异有统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,ELRIPC组、DLRIPC组、EDLRIPC组的AI值均降低,且差异有统计学意义(P<0.05),三组之间任意二组进行比较尚不能认为差异有统计学意义。结论:EDLRIPC、ELRIPC、DLRIPC作用于大鼠的I/RI肝后均产生明显的保护效应,ELRIPC与DLRIPC单独应用时所产生的保护效应的强度相似,二者相联合后的保护作用较二者单独应用时并未增强;LRIPC的保护作用可能与Bcl-2蛋白表达的上调、Bax蛋白表达的下调有关。