Rituximab（C2B8单抗）是美国FDA批准上市的第一个治疗非霍奇金氏淋巴瘤的基因工程抗体，尽管该药在临床治疗中显示出良好的疗效，但仍有48％的患者对该抗体治疗无理想反应，其重要原因是C288与CD20抗原的亲和力较低，因此不能有效杀伤低表达CD20分子的B淋巴瘤细胞。在本研究中，我们设计、构建并表达了2种新型四价结构的C2B8基因工程抗体，由于该抗体具有较低的解离速率（off-rate），因而能够在体外杀伤低表达CD20分子的B淋巴瘤细胞，具有较C2B8更强的抗肿瘤作用。本课题通过竞争抑制实验、补体介导的细胞毒实验（CDC）、抗体依赖细胞介导的细胞杀伤实验（ADCC）以及凋亡实验对四价抗体和C2B8抗体的体外生物学功能进行比较分析，同时还探讨了抗体与Clq、Fc受体的结合、抗体在CD20⁺细胞上的解离率、CD20⁺细胞在体外人全血环境中的清除情况以及抗体在动物体内的半衰期(T_1／2)。研究结果显示，在体内具有稳定结构的四价抗体因为解离率明显降低而产生了显著强于C2B8的CDC作用，从而能够杀伤低表达CD20分子的肿瘤细胞。通过体外全血中清除低表达CD20肿瘤细胞的实验，进一步证实四价C2B8抗体可通过CDC和ADCC机制发挥作用。本研究可能为低表达CD20B淋巴瘤的治疗提供新型抗体药物。