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吡喃酮型花色苷衍生物是一类具有非氧鎓离子结构和内酯型吡喃环结构的新型多酚类化合物。本研究以植物花色苷为原料,通过羧基吡喃花色苷形成及微氧化等两步反应法制备出吡喃酮型花色苷衍生物(Oxovitisin A),单因素和正交试验优化得到Oxovitisin A的最佳制备条件,高效液相色谱-二极管阵列检测-串联离子阱多级质谱(HPLC-DAD-EI-MS/MS)法对反应产物进行定量和定性分析,并结合柱色谱分离纯化技术制备出高纯度的Oxovitisin A。研究了Oxovitisin A在不同条件下的稳定性、呈色特性及光谱特征,以及体外清除ROS等自由基和氧化还原能力等方面的抗氧化活性。评价了Oxovitisin A对乳腺癌细胞(MCF-7)的生长抑制作用和凋亡因子调控作用,以及在人胃壁细胞(MKN-28)模型中的转运吸收效率,并与前体羧基吡喃花色苷(Vitisin A)和锦葵色素-3-O-葡萄糖苷(Mv-3-O-gluc)及甲基吡喃花色苷(Methylpyrano-Mv)进行比较,主要结果如下:1.以羧基吡喃花色苷溶液为反应物(1.0mg/mL),Oxovitisin A的最佳制备条件为:乙醇体积分数20%,控制温度45℃,pH值3.6,反应时间21d,该反应体系下Oxovitisin A产物得率为26.59%。HPLC-DAD-EI-MS/MS结合特征吸收光谱分析鉴定出主要产物为Oxovitisin A。采用聚酰胺树脂层析柱、TSK W40(S)凝胶树脂层析柱和制备型高效液相色谱联用纯化后的Oxovitisin A纯度为99.48%。2.Oxovitisin A在加热条件下稳定性显著高于前体花色苷Vitisin A和Mv-3-gluc,在50℃和90℃加热条件下,Oxovitisin A的半衰期分别为693.14h和67.30h。避光贮藏条件放置7h后,三种色素样品的稳定性从高到低依次为Oxovitisin A>Vitisin A>Mv-3-gluc;光照处理7h后,Oxovitisin A的保存率为92.49%,Vitisin A和Mv-3-O-gluc分别为63.30%和73.53%,说明Oxovitisin A结构稳定,贮藏稳定性和耐光照能力要强于前体花色苷。此外,在200ppm的漂白浓度下,Oxovitisin A抵御SO2漂白的能力最强,吸光值变化最小。3.不同pH值下Oxovitisin A的紫外光谱和呈色特征研究表明Oxovitisin A在酸性和中性条件下紫外光谱和色泽空间表征参数变化很小,pH值>9时,Oxovitisin A的λmax向长波方向移动,波形仍能保持平滑,且吸收峰增强,样品呈更浓郁的黄色,饱和度增加。表明这类物质的结构和呈色稳定性较高,不易受pH值介质的影响。4.Oxovitisin A在甲醇溶液中的摩尔消光系数要大于Mv-3-O-gluc、Vitisin A和甲基吡喃花色苷;碱性条件下,Oxovitisin A能保持结构稳定,且摩尔消光系数相比酸性和中性条件要更高。Oxovitisin A的荧光光谱研究表明在440nm左右激发波长下,具有较强的荧光发射谱峰(发射波长为490nm),但其前体花色苷均不具有荧光特性,这与Oxovitisin A类似于黄酮类化合物的特殊结构有关。5.DPPH、ABTS+自由基的清除试验和FRAP还原能力测试结果表明Oxovitisin A及其前体花色苷均具有较强的抗氧化活性。采用微弱化学发光法,在三种化学发光体系中研究Oxovitisin A及前体物的抗氧化活性,均证明Oxovitisin A解离出氢质子的能力强,供氢后形成自由基中间体结构更稳定,清除ROS自由基的能力要强于前体花色苷和Vitamin C。6.Oxovitisin A能显著抑制MCF-7细胞增殖(IC50=0.083±0.011 mg/m L),抑制效果明显强于Vitisin A和Methylparano-Mv。在调控细胞凋亡因子水平测试中,MCF-7细胞对Oxovitisin A的作用最为敏感,促凋亡因子(Caspase家族、肿瘤坏死因子a)的检出水平最高,高于前体花色苷(Mv-3-O-gluc、Vitisin A)和Methylparano-Mv。对MCF-7细胞内的吸收动力学研究表明,Oxovitisin A能够快速的进入细胞(4分钟内已经完全纳入细胞),直接作用于细胞核及其周围线粒体,并长时间作用保留。7.不同时段内Oxovitisin A在胃壁细胞单层膜模型中的转运吸收效率均为最高,表明除了花色苷B环上取代基结构和母环上连接的糖基外,在花色苷衍生物D环及其连接的取代基和Oxovitisin A本身的非氧鎓离子结构对花色素类在人胃壁模型中的转运吸收也有重要影响。