荧光染料DTAF-MOR的合成及其金属增强荧光效应

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活性荧光染料可以与生物分子中的-OH、-SH和-NH2等进行特异性结合,是一支重要的荧光探针试剂,广泛用于生命科学、药物化学、分析化学等领域。5-氨基荧光素(5-AF)是一种活性基荧光素衍生物,因其量子产率低不具有实际应用价值。本文以5-AF为母体,以三聚氰氯为连接基团,将氮氧杂环吗啉引入分子结构中,设计合成新型活性荧光染料5-[(4-吗啉基-6-氯-1,3,5-均三嗪)-氨基]荧光素(DTAF-MOR)。该染料不仅可以有效提高染料发光特性,赋予其新的活泼反应位点,增加与生物体的键合能力,改善纺织品染色的牢度。同时,还可以加强染料对金属离子的络合能力,改变其pH值敏感区域,提高染料的环境响应性能。另一方面,基于金属增强荧光的荧光放大效应可以有效提高荧光检测灵敏度,增加光稳定性,降低背景光谱的干扰,为拓宽荧光染料的应用途径提供了依据。为此,本论文研究了银颗粒的金属增强荧光效应,为制备新型活性基荧光放大传感材料奠定基础。主要的研究内容和结论如下:首先,根据三聚氰氯在不同温度下的反应活性,分四步合成了活性基荧光染料DTAF-MOR,并通过光学性能检测,从理论上分析其成为传感材料的可行性。结果表明,与母体5-AF相比,DTAF-MOR的光学物理参数均有所提高,其中荧光量子产率从0.017增大到0.294,斯托克斯位移、荧光能量产率、振子强度和荧光寿命也有不同程度的提高。此外,DTAF-MOR具有显著的浓度效应、溶剂效应、pH值效应,对二价金属阳离子,如 Mg2+、Ni2+、Mn2+、Cu2+、Zn2+、Fe2+、Co2+都有一定的识别性能,其中对Mg2+的识别效果最佳,经检测、计算,确定二者形成4:1的络合结构。其次,采用种子生长法制备了球形和棒形银颗粒,考察了原料摩尔比、反应温度、pH值对球形纳米银颗粒产率和粒径均一性的影响;探讨了晶种添加量、原料添加摩尔比对棒形银颗粒形貌的影响。分别将球形和棒形银颗粒用于荧光素衍生物的金属增强荧光效应检测。结果证实,随着球形纳米银加入量的增多,荧光素(FL)、6-羧基荧光素(6-FAM)和DTAF-MOR的荧光谱峰均有增强,由于6-FAM与银颗粒之间距离适中而效果最好,DTAF-MOR次之,FL最差。棒形银溶胶的吸收共振峰与DTAF-MOR的激发、发射光谱重叠区域越大,荧光增强效果越好。
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